[发明专利]制取水痘病毒原液的方法及其应用

权利要求书

1.一种制取水痘病毒原液的方法，其特征在于将27代MRC-5细胞于添加5v/v％牛血清的无血清细胞培养液中，37℃静置培养3～5天至细胞单层成片，按1:2或1:4的分种率连续传代扩增至第34代和第35代；

待34代细胞生长成片后，按照MOI 0.001～0.01比例接种VZV-OKa毒株，细胞维持液置换为无血清培养基，置36℃静止培养，待病变率达到30％～50％，胰酶消化，重悬后制备病变细胞悬液，34代病变细胞与35代细胞按照1:20比例，将34代病变细胞悬液接种至第35代细胞，细胞维持液置换为无血清培养基后，置36℃静止培养2天，待病变率达到65％～80％后，使用EDTA消化，离心处理，加入疫苗保护液重悬，反复冻融后即得；

所述的无血清细胞培养液采用MCDB201无血清培养基。

2.根据权利要求1所述的制取水痘病毒原液的方法大幅降低疫苗中的牛血清白蛋白残留量60％以上。

3.根据权利要求1所述的制取水痘病毒原液的方法制得的水痘病毒原液所含的牛血清白蛋白5ng/ml～15ng/ml。

4.根据权利要求1～3之一所述的制取水痘病毒原液的方法在制取水痘减毒活疫苗中的应用。

5.一种制取水痘疫苗的方法，其以权利要求1～3之一所述的制取水痘病毒原液的方法而制取水痘减毒活疫苗。

6.根据权利要求5所述的制取水痘疫苗的方法，其特征在于以所述的制取水痘病毒原液的方法而制取水痘减毒活疫苗的牛血清白蛋白含量为2ng/剂～8ng/剂。