[发明专利]一种量子点标记抗体探针试纸条及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种量子点标记抗体探针试纸条的制备方法，其特征在于，步骤为：

（1）量子点标记苯噻菌酯抗体探针的制备：将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺通过共价偶联法制备量子点标记苯噻菌酯抗体探针；

（2）样品垫的处理步骤：用含有2 % w/v牛血清白蛋白、2 %蔗糖、0.1 %叠氮化钠和2.5% w/v聚乙烯基吡咯烷酮的20 mM pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液浸泡玻璃纤维膜12 h，捞出沥干，37 ℃烘4 h，烘干后放4 ℃冰箱备用，即得样品垫和初级结合垫；

（3）结合垫的处理步骤：裁取0.8 cm宽步骤（2）得到的初级结合垫，向初级结合垫上，以5-10 μL/cm的速度喷涂0.1-0.8 μmol/L量子点标记苯噻菌酯抗体探针，自然晾干，即得结合垫；

（4）硝酸纤维素膜的处理步骤：裁取2.5 cm硝酸纤维素膜，在硝酸纤维素膜的近吸水垫端0.6 cm处，用划膜液点划0.2 mg/mL的羊抗鼠抗体作为C线，从C线向远离吸水垫端依次用苯噻菌酯抗原喷涂出T₁、T₂、和T₃线，三者之间间隔0.4 cm，T₁、T₂、和T₃线上苯噻菌酯抗原的浓度为1.68、0.42和0.11 mg/mL，喷涂之后自然晾干即得试纸条硝酸纤维素膜；

（5）吸收垫的处理步骤：裁取1.5 - 2 cm的吸水纸作为吸收垫；

（6）试纸条的组装：将步骤（4）得到的试纸条硝酸纤维素膜固定于底板居中的位置上，将结合垫一端压在试纸条硝酸纤维素膜上，重叠0.2 cm，另一端固定在底板上，并与底板平齐；将样品垫一端压在结合垫上，重叠0.2 cm，另一端固定于底板上，并与底板平齐；使吸收垫的一端与底板的另一端平齐，吸收垫的另一端压在试纸条硝酸纤维素膜上，重叠0.2 cm，完成试纸条的组装；

所述量子点标记抗体探针试纸条，包括底板、硝酸纤维素膜、样品垫、结合垫以及吸收垫，所述硝酸纤维素膜位于底板上方，硝酸纤维素膜左侧的底板上依次设有样品垫和结合垫、右侧的底板上设有吸收垫；所述结合垫上分布有量子点标记抗体探针，硝酸纤维素膜上还分布有苯噻菌酯抗原和羊抗鼠抗体。

2.如权利要求1所述的量子点标记抗体探针试纸条的制备方法，其特征在于：所述底板为宽6 cm的荧光定量用底板，硝酸纤维素膜宽2.5 cm，样品垫和结合垫宽0.7 - 1.2 cm，吸收垫的宽度为1.5 - 2 cm，样品垫与结合垫重叠0.2 cm，结合垫硝酸纤维素膜分别重叠0.2cm，吸收垫覆盖硝酸纤维素膜0.2 cm。

3.如权利要求1所述的量子点标记抗体探针试纸条的制备方法，其特征在于：所述宽度2.5 cm的硝酸纤维素膜上依次设有检测线简称T线，共三条检测线，依次记为T₃、T₂、T₁线，硝酸纤维素膜上还设有一条控制线简称C线，T₃线与结合垫端的距离为0.6 cm，T₃线、T₂线以及T₁线之间的间隔为0.4 cm， T₁线与C线之间的距离为0.5 cm。

4.如权利要求1所述的量子点标记抗体探针试纸条的制备方法，其特征在于：所述T₃、T₂和T₁线上设有苯噻菌酯抗原，苯噻菌酯抗原为苯噻菌酯-牛血清白蛋白复合物，T₃、T₂和T₁线上苯噻菌酯抗原的浓度依次为0.11 mg/mL、0.42 mg/mL、1.68 mg/mL。

5.如权利要求1所述的量子点标记抗体探针试纸条的制备方法，其特征在于：所述C线上设有羊抗鼠抗体，浓度为0.2 mg/mL。