[发明专利]一种多指标成分UPLC检测红花中有效成分含量方法

说明书

本发明提供一种多指标成分UPLC检测红花中有效成分含量方法，该检测方法测定红花药材中6‑羟基山奈酚‑3，6，7‑三‑O‑葡萄糖苷、羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B活性成分的含量，其具有操作简便、准确、高效的优点，该检测方法可以应用于红花药材的内在质量控制方法。

技术领域

本发明技术涉及药物检测领域，具体涉及一种多指标成分UPLC检测红花中有效成分含量方法。

背景技术

红花又名红蓝花，刺红花，为菊科红花属植物的干燥管状花。红花是我国传统药材，始载于《开宝本草》。《本草纲目》称红花能“活血、润燥、止痛、散肿通经。中医上认为红花味辛、微苦、性温、归心和肝经，具活血通经、散瘀止痛、讲血压、降血脂的功效，用于经闭、痛经、跌打损伤、冠心病、心绞痛和高血压等疾病。红花在现代临床中成为预防和治疗冠心病、心肌梗死和脑血栓等疾病的重要中药。现代药理实验表明：红花能改善心脑血氧供应、减轻缺血性损伤、抗凝血、抗心肌缺血、抑制血小板聚集、抗氧化、抗肿瘤和抗炎等药理作用。红花化学成分复杂，迄今，从红花中分离鉴定100多种化合物，主要含有查尔酮类色素、黄酮类、酚酸类、甾体类及多糖类等化合物。采用2015版《中国药典》“红花”项下有效成分检测指标和药典之外的2个活性成分为标准，旨在为评价红花的质量提供科学依据。质控指标应选择药材中药理作用比较明确的有效成分或与药材临床功效具有相关性的指标性成分，预试验在质控指标中选择的待测成分，有时可能只是文献数据，能否作为多指标质控指标，需进行实际验证。因此，在确定了多成分同时测定的色谱条件后，应对收集的样品进行初步分析，重点关注分析条件和各待测成分峰面积范围等信息。待测成分含量应有相对较高的含量，原则上应≥1mg·g^-1。

由于红花其在众多的中药组方中都有较频繁的应用，因此，如何有效地评价红花中药材内在质量是许多药厂研究热点，对于传统的中药材多成分、多进行中药材质量的评价，多成分多指标的控制方式应运而生，而这种质量控制方式却存在它的弊端，其高昂的检测费用和繁琐检测操作难以应用于工业化大生产中。本研究拟订通过一测多评的方法对红花中多种有效成分进行含量测定，以建立科学合理的内在质量评价方法。

发明内容

本发明目的在于提供一种多指标成分UPLC检测红花中有效成分含量方法，该检测方法红花药材中3个活性成分含量的方法，该检测方法具有快速，简便，准确的优点。弥补现有药材质量控制技术不够完善和科学的不足，更好的控制红花提取物的质量。

本发明的技术方案为：一种多指标成分定量测定红花中3个活性成分含量的方法：该方法使用的对照品包括：6-羟基山奈酚-3，6，7-三-O-葡萄糖苷、羟基红花黄色素A和脱水红花黄色素B。

为了实现上述发明的目的，本发明专利申请的技术方案为：

一种UPLC多指标成分测定红花中的活性成分含量方法，包括如下步骤：

⑴、红花供试品溶液的制备：精密称取红花药材粗粉，精密加水溶解重量，超声处理30～50min，过滤，得供试品滤液；

⑵、对照品溶液的制备：精密称取对照品6-羟基山奈酚-3,6,7-三-O-葡萄糖苷，羟基红花黄色素，脱水红花黄色素B适量，加甲醇溶解，配制为混合对照品溶液；

⑶、色谱条件：以亚乙基桥杂化颗粒为填充剂，以乙腈为流动相A相，以0.5％甲酸为流动相B相；其体积配比为流动相A相：流动相B相为：2-20：98-80，进行线性梯度洗脱，流速每分钟为0.08～0.12mL，检测波长270～280nm，柱温25～35℃；

⑷、色谱峰测定：将上述步骤(⑴所制得的红花供试品溶液注入高效液相色谱仪，得到红花有效成分的色谱图，即得。

优选的，所述步骤⑴红花供试品溶液制备方法中，精密称取红花药材粗粉，精密加水50mL，超声处理40min，过滤，取滤液，经0.22μm滤膜过滤。