[发明专利]一种苦丁茶老叶中绿原酸的提取工艺

说明书

本发明涉及一种从苦丁茶老叶提取绿原酸的方法，对苦丁茶老叶粗粉进行乙醇和乙酸乙酯的提取，得到绿色的结晶，提取物为绿原酸。本发明从苦丁茶老叶中提取绿原酸，并且提供提取绿原酸的工艺，其提取工艺简单，成本低，还能有效抑制人肝癌细胞HepG2和小鼠结肠癌细胞CT26的增值，可提高苦丁茶副产物的综合利用率，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于药用植物提取技术领域，具体涉及一种大叶冬青苦丁茶老叶中绿原酸的提取工艺。

背景技术

由于绿原酸结构复杂，人工合成困难，大都是从天然植物中提取分离得到，如金银花、枇杷叶等都是绿原酸的主要原料。绿原酸的提取分离大都使用有机溶剂法和硅胶柱层析法。有机溶剂法具有过程繁琐、含量低等特点；硅胶柱层析法在工业操作上会有一定的困难。

苦丁茶，是冬青科，冬青属苦丁茶种常绿乔木，是我国一种传统的纯天然保健饮料佳品，具有清热消暑、润喉止咳、抑癌防癌、抗衰老、活血络等各种功效。苦丁茶中含有苦丁皂甙、氨基酸、维生素C、多酚类、黄酮类、咖啡碱等两百多种成分。苦丁茶树开始生长后约25天内，其幼芽嫩叶尚可作为制作嫩茶的原料，但其采摘时间短促、数量少、制作成本高。待到25天后幼叶迅速长足，叶质变硬，成为老叶，老叶采摘时间长、数量多、资源丰富，但只能用其制作老叶茶。老叶茶与嫩茶相比，口感差、不耐冲泡，品质相差甚远。因此，老叶作为苦丁茶副产物，经常当成垃圾扔掉，造成资源的浪费。

大叶冬青苦丁茶老叶资源丰富，其中绿原酸的含量为1%以上，是目前发现的为数不多的绿原酸含量在1%以上的天然植物，是一种不可多得的用于提取绿原酸的优质原料。目前尚未见有从大叶冬青苦丁茶老叶中提取绿原酸的相关报道。因此，研究和建立从苦丁茶老叶中提取绿原酸的方法有助于深入开发利用苦丁茶资源和降低绿原酸的生产成本。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以大叶冬青苦丁茶老叶的提取工艺，该方法提取工艺简单，可较好地降低成本，提高提取效率。

本发明采用以下技术方案：

一种苦丁茶老叶中绿原酸的提取工艺，包括以下步骤：

（1）采摘足量的苦丁茶老叶，45℃烘干，干燥后粉碎成末；

（2）将茶粉与无水乙醇以固液比1:15进行提取，可使用回流提取或者超声提取；

（3）初提完的乙醇溶液通过离心除去残渣，将除去残渣的乙醇提取液减压浓缩，浓缩液用硫酸调到pH=4左右，加水充分沉淀，过滤，烘干沉淀物；

（4）对浓缩液进一步浓缩成膏状，向膏状物中加入4倍体积乙酸乙酯，洗涤三次；

（5）将膏状物进行冷冻干燥，得到无水苦丁茶绿原酸提取物粉末。

优选的，所述的步骤（2）中苦丁茶老叶茶粉与无水乙醇固液比为1:15；回流提取时间为12h，提取温度为85℃，或者超声提取时间为12h，提取温度为50℃。

优选的，所述的步骤（3）中离心可选择相对离心力为10000Xg，运动时间为15min，或者相对离心力为8000Xg，运动时间为30min；沉淀选择静置20小时。

优选的，所述的步骤（4）中加入浸膏体积4倍的乙酸乙酯洗涤。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：选择资源丰富且目前处于废弃不用状态的大叶冬青苦丁茶老叶作为原料；所用的试剂对环境污染小，过程中主要使用乙醇溶液，少量使用乙酸乙酯液去除去脂类物质；经过多次回流提取或超声提取可将苦丁茶老叶中的有效成分提取更为完全；通过高速离心的方法能减少提取液中的杂质，使得纯度高，提高产品品质；减压浓缩的乙醇得以回收可重复利用，可减少乙醇溶剂的浪费，降低成本。

附图说明

图1为本发明的绿原酸标准品的高效液相色谱(HPLC)图谱。