[发明专利]新型启动子及其应用

说明书

本发明的发明名称为新型启动子及其应用。本发明涉及新型启动子、包含该启动子的载体、包含该启动子或该载体的微生物以及使用该微生物生产目标产物的方法。

本申请是分案申请，原申请的申请日为2017年3月20日、申请号为201780000208.5、发明名称为“新型启动子及其应用”。

技术领域

本公开涉及新型启动子、包含该启动子的载体、包含该启动子或载体的微生物以及使用该微生物生产目标产物的方法。

背景技术

已经进行不断的努力来使用微生物以高滴度生产目标产物，如氨基酸或包括饲料、药物、食品等的可用于各种目的的有用物质(韩国专利号10-0924065)。作为此类方法中的一种，存在诱导微生物中目标基因的过表达的方法，并且对于此目的而言，高效的基因表达系统是必需的。由于启动子是重要地参与基因表达系统的因素之一，因此对有用启动子的开发是必要的。

大肠杆菌(E.coil)来源的tac启动子被广泛认为是强启动子。就棒状微生物而言，通过修饰自身基因的启动子来开发强启动子(Gene,102,93-98,1991；Microbiology,142,1297-1309,1996)。例如，就源自产氨棒状杆菌(Corynebacterium ammoniagenesis)的启动子而言，公开了与大肠杆菌中报道的tac启动子相比有约10％的提高(Biotechnol.Lett.25,1311-1316,2003)。此外，作为源自产氨棒状杆菌的强启动子，开发出具有不同强度的Pcj1至Pcj7启动子，并且它们具有比tac启动子高至少10倍的强启动子活性(韩国专利号10-0620092)。此外，开发出由谷氨酸棒状杆菌(Corynebacteriumglutamicum)合成而具有强启动子活性的Po2启动子(韩国专利号10-1632642)。然而，由于与大肠杆菌的基因表达系统相比在棒状杆菌(Corynebacterium)中表现出高表达效果的系统是必要的，所以仍需要开发启动子。

在该情况下，本发明人已经做出许多努力来找到可以强有力地诱导棒状杆菌属微生物中的基因表达的启动子。结果，他们已经开发出本公开的新型的合成启动子，并证实与已知的启动子相比，该启动子具有更高的表达活性，从而完成本公开。

发明内容

技术问题

本公开的目的是提供具有启动子活性的新型核酸分子；含有该核酸分子和目标基因的基因表达盒；含有该核酸分子或基因表达盒的重组载体；含有该启动子或载体的重组微生物；以及使用该重组微生物生产目标产物的方法。

技术方案

为了实现本公开的目的，本公开一方面提供了由选自SEQ ID NO:1至3的任何一个核苷酸序列组成的具有启动子活性的核酸分子。

如本公开所使用的，术语“启动子”是指位于编码区上游的非翻译核酸序列，其包括聚合酶结合位点，并且具有启动将位于启动子下游的基因转录成mRNA的活性，即聚合酶所结合的并启动基因转录的DNA结构域。启动子可位于mRNA转录起始结构域的5'结构域。

在本公开中，由选自SEQ ID NO:1至3的任何一个核苷酸序列(即，SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的核苷酸序列)组成的具有启动子活性的核酸分子被分别命名为SPL1、SPL7和SPL13。具有启动子活性的核酸分子也可命名为启动子，并且上述所有术语都可在本公开中使用。

本公开的启动子能够表达目标基因，所述目标基因可操作地连接至目标微生物中具有启动子活性的核酸分子，并且可以用作通用(general-use)启动子。