[发明专利]肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备设备及方法

权利要求书

1.一种肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备设备，包括自制小滤器，其特征在于：所述自制小滤器包括内套管、外套管和滤膜，内外两个套管和滤膜嵌合在一起，能够组装和拆卸；所述内套管的长度大于外套管，内套管的两端均伸出外套管一定的长度；所述滤膜嵌合在内外两个套管相同的一端之间，并完整包裹住内套管的端口；还包括EP管，EP管的一端为封闭的圆锥形，另一端为开口的圆柱形，所述自制小滤器通过圆柱形开口端嵌入到EP管中；

所述EP管的容量为1.5ml；所述内套管的长为36mm，内直径为5mm，外直径为6mm；所述外套管的长为26mm，内直径为6mm，外直径为8mm；所述滤膜为直径为25mm的圆形，孔径可根据虫体的大小进行选择。

2.根据权利要求1所述的一种肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备设备，其特征在于：所述EP管的开口端还设有用于封闭管子的盖子，所述盖子通过固定的带子与EP管连接在一起。

3.根据权利要求1至2任一项所述的一种肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一，样品收集与清洗：将寄生原生动物从肠道中挑取出来置于0.65％生理盐水中，静置10min；收集虫体，转移至新的生理盐水滴中，连续清洗3次，每次10min；

步骤二，样品固定与清洗：将步骤一中清洗干净的虫体置于2.5％戊二醛中固定2-4h，然后将固定好的虫体置于自制小滤器中，放入装有PBS缓冲液的EP管中清洗样品3次，每次10min，以彻底除去戊二醛；

步骤三，样品脱水与置换：将装有虫体的自制小滤器依次进行梯度酒精脱水，每次5min；然后进行乙酸异戊酯梯度置换，每次5min；然后将虫体从自制小滤器的滤膜上取出置于100％醋酸异戊酯中，放置10min；

步骤四，样品干燥与镀膜：将虫体置于用多聚赖氨酸处理过的特制玻片上，并用眉毛笔调整虫体体位，以适应不同部位的观察需求；然后用临界点干燥仪进行干燥，用离子溅射仪镀膜，完成扫描电镜样品的制备。

4.根据权利要求3所述的一种肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备方法，其特征在于：步骤三中所述依次进行梯度酒精脱水包括30％，50％，70％，90％，95％，100％，100％。

5.根据权利要求3所述的一种肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备方法，其特征在于：步骤三中所述乙酸异戊酯梯度置换包括无水乙醇、醋酸异戊酯1:1溶液1次，100％醋酸异戊酯1次。

6.根据权利要求3所述的一种肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备方法，其特征在于：步骤四中所述特制玻片的尺寸大小为1cm×1cm。

7.根据权利要求4至6任一项所述的一种肠道寄生原生动物扫描电镜样品的快速制备方法，其特征在于：对制备所得的扫描电镜样品，采用扫描电镜进行观察，用以判断样品的质量。