[发明专利]用于基因检测的微生物样本保存液及其制备方法、试剂盒与应用

说明书

本发明提供了用于基因检测的微生物样本保存液及其制备方法、试剂盒与应用，属于生物工程技术领域。本发明提供的用于基因检测的微生物样本保存液，更加有效、全面的微生物灭活能力；使用较低浓度的乙醇，在样本存放过程中能够更加彻底灭活细菌，避免高浓度乙醇造成的细菌应激反应而使灭活失败。在不破坏细胞结构的前提下，具有良好的渗透性，有效破坏细菌和病毒的蛋白活性与各类核酸酶活性，使其不再具有感染或增殖能力，灭活效果彻底。使用含有甘油的细胞保护剂和生理浓度缓冲液，能够维持微生物的细胞结构，避免细胞结构破裂，从而保护细胞内核酸的完整；没有高毒性组分或挥发组分，使用过程中不会产生挥发性毒害。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体而言，涉及用于基因检测的微生物样本保存液及其制备方法、试剂盒与应用。

背景技术

目前市场的口腔\粪便细菌保存液都是以乙醇\甲醇\SDS为主要成分，制备成弱碱性的等渗溶液，能够对样本中的细菌进行杀灭，但是会对细胞结构造成破坏，致使细胞内含物释放出来，不能用于免疫或者其他方法的检测。同时，保存液中的甲醇\异硫氰酸胍具有挥发性或较高的毒性，在使用过程中容易造成挥发，对操作人员造成伤害。

现有的保存液使用高纯度的乙醇灭活；部分菌对高浓度乙醇会产生应激反应，导致灭活效果降低；含有保护核酸成分，但是保存液中大量的表面活性剂也会造成细胞破裂，致使核酸等处于暴露环境，易被降解破坏；部分灭活剂的毒性较高，使用过程中操作失误会对使用人员产生毒害。

发明内容

本发明的第一目的在于提供用于基因检测的微生物样本保存液，该保存液具有更有效的微生物灭活能力。

本发明的第二目的在于提供上述的用于基因检测的微生物样本保存液在微生物样本保存中的应用。

本发明的第三目的在于提供一种用于基因检测的微生物样本保存液的制备方法，通过简单方法制备出大量的，效果良好，性能稳定的保存液。

本发明的第四目的在于提供一种用于基因检测的微生物样本保存的试剂盒。

本发明的第五目的在于提供上述的用于基因检测的微生物样本保存的试剂盒在微生物样本保存中的应用。

本发明的第六目的在于提供上述的用于基因检测的微生物样本保存的试剂盒在细胞样本保存中的应用。

本发明的第七目的在于提供上的用于基因检测的微生物样本保存的试剂盒在细菌灭菌中的应用。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

用于基因检测的微生物样本保存液，按照重量份计，微生物样本保存液包括乙二胺四乙酸二钠8.2-13.4份、盐酸胍2.7-4.3、NaCl2.5-4.4份和Tris·HCl0.8-1.5份；按照体积份数计，还包括DMSO17-26份，甘油0.7-1.5份，其中每重量份固体对应每体积份的液体。

上述的用于基因检测的微生物样本保存液在微生物样本保存中的应用。

一种用于基因检测的微生物样本保存液的制备方法，按重量份计，取乙二胺四乙酸二钠8.2-13.4份、盐酸胍2.7-4.3份、NaCl2.5-4.4份和Tris·HCl0.8-1.5份；按体积份计，取DMSO17-26份，甘油0.7-1.5份，每份固体物质对应每份液体物质，将乙二胺四乙酸二钠、NaCl、Tris·HCl、DMSO和甘油混合，与45-55体积份的乙醇混合，用水定容至100体积份，调整pH。

一种用于基因检测的微生物样本保存的试剂盒，试剂盒包括上述的用于基因检测的微生物样本保存液。

上述的用于基因检测的微生物样本保存的试剂盒在微生物样本保存中的应用。

上述的用于基因检测的微生物样本保存的试剂盒在细胞样本保存中的应用。