[发明专利]一种细胞色素c检测方法及试剂盒有效
申请号: | 201810336002.6 | 申请日: | 2018-04-16 |
公开(公告)号: | CN108956726B | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
发明(设计)人: | 温俊林;周顺桂;余震;杨贵芹;汤佳 | 申请(专利权)人: | 广东省生态环境技术研究所 |
主分类号: | G01N27/30 | 分类号: | G01N27/30;G01N27/327;G01N27/48 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 胡辉 |
地址: | 510650 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 色素 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种检测细胞色素c的检测方法,其特征在于,包含以下步骤:
1)将待测微生物细胞液滴加到丝网印刷碳电极的工作电极表面,干燥,制成微生物修饰的丝网印刷碳电极;
2)将四甲基联苯胺溶液滴加到微生物修饰的丝网印刷碳电极,反应至11分钟时,用仪器进行电化学反应检测,检测其产生的电流强度;
3)根据电流强度分析判断待测细胞中是否含有细胞色素c。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)所述的微生物细胞液由微生物细胞和磷酸缓冲液组成。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)所述仪器为电化学工作站,进行电化学反应检测的电压为-0.30V~-0.10V;所述电化学反应中,洗涤缓冲液是0.01M~0.03M、pH 5.4~9.4的磷酸盐缓冲液;检测缓冲液是0.1M~0.3M、pH 3.0~7.0的磷酸柠檬酸缓冲液。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述四甲基联苯胺溶液含有30~70μL的0.05~0.2mg/ml四甲基联苯胺,1~10%v/v无水乙醇,0.3~0.7mM H2O2,30~70%v/vPBS缓冲液,余量为水。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述四甲基联苯胺溶液的用量为30~70μL。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,根据电流强度分析判断待测细胞中是否含有细胞色素c的具体方法为:观察开始检测后的第10秒处的电流强度值,若电流强度值在-0.23μA以上,说明此样品中含有细胞色素c。
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