[发明专利]一种用于快速检测紫杉醇的试纸及其制备方法、试剂盒

说明书

本发明涉及一种用于快速检测紫杉醇的试纸及其制备方法、试剂盒，属于生物技术领域。本发明用于快速检测紫杉醇的试纸，包括样品垫、荧光微球标记物垫、NC膜、吸水纸、底板；所述样品垫、荧光微球标记物垫、NC膜、吸水纸依次粘贴于底板上；所述荧光微球标记物垫上包被有荧光微球紫杉醇‑BSA‑生物素标记物、荧光微球兔IgG标记物；所述NC膜上分别包被有紫杉醇抗体、链霉亲和素、羊抗兔IgG。采用本发明的试纸进行检测，快速、灵敏，仅需时5‑20分钟即可定量测定，可广泛应用于POCT临床治疗药物监测(TDM)。

技术领域

本发明涉及一种用于快速检测紫杉醇的试纸及其制备方法、试剂盒，属于生物技术领域。

背景技术

紫杉醇(Taxol or Paclitaxol)是一种具有抗肿瘤活性的天然产物，作用机制独特，抗瘤谱广，近年来受到广泛重视。用于治疗乳腺癌，卵巢癌和非小细胞癌等，是最常用的细胞毒性剂之一，但其有效治疗窗(有效浓度和毒性浓度之差)窄、个体差异大、毒副作用强，紫杉醇的血药浓度和治疗效果的之间的关系，因个体药物代谢的差异而相距甚大。紫杉醇在血液中约90％与血清蛋白结合，而唾液水平与其血液的游离药物浓度直接相关。通过监测血液中特别是唾液中的紫杉醇水平和调节剂量，可以更好地控制和限制患者毒副作用的发生。快速有效地控制治疗药物毒性、改善治疗效果，对治疗药物进行血药浓度监测及个体化剂量调整是十分必要且可行的。

治疗药物检测(TDM)是在药代动力学原理的指导下，应用先进的技术平台，快速测定血液中治疗药物浓度，有效地帮助临床医生给药方案个体化，以提高药物的疗效，避免或减少毒副反应，给患者提供最佳用药方案，同时也为药物过量中毒的诊断和处理提供有价值的实验室依据。

POCT泛指近患者床旁进行的一种快速检测分析技术，它能在床旁、病房或中心实验室之外的其他地方开展，亦称之为即时临床检测或床边检测。用于POCT的传统定量免疫检测产品(放免法、酶联法)都需要将标记的抗原或抗体(探针)和游离(探针)的抗原或抗体进行分离，才能通过仪器读取结果，所需时间长、操作步骤多、系统误差大。

目前国内市场中关于紫杉醇POCT检测还处于空白期，因此，急需开发一种快速检测人体唾液或血液中紫杉醇的试纸。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种用于快速检测紫杉醇的试纸，用该试纸能够实现紫杉醇的临床快速检测。

本发明的第二个目的在于提供一种用于快速检测紫杉醇的试纸的制备方法。

本发明的第三个目的在于提供一种用于快速检测紫杉醇的试剂盒。

为实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种用于快速检测紫杉醇的试纸，包括样品垫、荧光微球标记物垫、NC膜、吸水纸、底板；所述样品垫、荧光微球标记物垫、NC膜、吸水纸依次粘贴于底板上；所述荧光微球标记物垫上包被有荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物、荧光微球兔IgG标记物；所述NC膜上分别包被有紫杉醇抗体、链霉亲和素、羊抗兔IgG。

本发明的用于快速检测紫杉醇的试纸，利用荧光免疫层析技术，采用紫杉醇抗体检测紫杉醇。当待测样本中不含紫杉醇或者紫杉醇浓度低于最低检测限时，荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物会与预包被的紫杉醇抗体结合(D区)，T区无法形成可被荧光读数仪检测到的信号反应线；当待测样本中含有的紫杉醇浓度等于或高于最低检测限时，紫杉醇和荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物，在层析作用下沿着硝酸纤维膜向前移动，小分子的紫杉醇在硝酸纤维膜上爬行较快，先行与紫杉醇抗体结合，抑制紫杉醇抗体和荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物的结合，荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物则被检测区(T区)预包被的链霉亲和素Strepdavidin结合，最终在T区形成可被荧光读数仪检测到的信号反应线；荧光信号的强弱与样本中紫杉醇含量存在正相关，样本中紫杉醇浓度越高，T线信号质越强；质控区(C)包被羊抗兔IgG多克隆抗体，无论样本中是否存在紫杉醇，荧光微球兔IgG标记物均会与C区多抗反应形成荧光反应信号。