[发明专利]一种用于快速检测紫杉醇的试纸及其制备方法、试剂盒有效
申请号: | 201810325433.2 | 申请日: | 2018-04-12 |
公开(公告)号: | CN108732344B | 公开(公告)日: | 2021-06-11 |
发明(设计)人: | 王慧英 | 申请(专利权)人: | 江苏维尔生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/577;G01N33/533;G01N33/50 |
代理公司: | 常州智慧腾达专利代理事务所(普通合伙) 32328 | 代理人: | 曹军 |
地址: | 213000 江苏省常州市西太湖科技产业园长*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 快速 检测 紫杉醇 试纸 及其 制备 方法 试剂盒 | ||
1.一种用于快速检测紫杉醇的试纸,其特征在于,包括样品垫、荧光微球标记物垫、NC膜、吸水纸、底板;所述样品垫、荧光微球标记物垫、NC膜、吸水纸依次粘贴于底板上;所述荧光微球标记物垫上包被有荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物、荧光微球兔IgG标记物;所述NC膜上依次包被有紫杉醇抗体、链霉亲和素、羊抗兔IgG。
2.根据权利要求1所述的用于快速检测紫杉醇的试纸,其特征在于,所述荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物由包括以下步骤的制备方法制得:将荧光微球溶液与2-吗啉乙磺酸溶液混匀,之后加入N-羟基硫代琥珀酰亚胺,再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐混匀后反应30min,之后离心10min,弃上清液后加入稀释后的紫杉醇-BSA半抗原,超声重悬,反应4小时,然后加入生物素-NHS溶液,反应2小时,再加入BSA溶液封闭,混匀,搅拌反应0.5h小时,离心15min,弃去上清液,用微球储存液超声重悬,4℃保存。
3.根据权利要求2所述的用于快速检测紫杉醇的试纸,其特征在于,所述稀释后的紫杉醇-BSA半抗原的浓度为0.7~1.0mg/ml。
4.根据权利要求2所述的用于快速检测紫杉醇的试纸,其特征在于,所述紫杉醇-BSA半抗原由包括以下步骤的制备方法制得:
1)紫杉醇半琥珠酸酯的制备:将紫杉醇、丁二酸酐溶于吡啶溶液中,室温反应过夜,将所得反应液滴加入冰水中,过滤收集沉淀,洗涤、干燥,即得;所述紫杉醇与丁二酸酐的质量比为20:38;
2)紫杉醇-BSA半抗原的制备:将步骤1)所得的紫杉醇半琥珠酸酯溶于DMF,然后加入2-吗啉乙磺酸、N-羟基硫代琥珀酰亚胺,室温反应2小时,得活化的紫杉醇,将活化的紫杉醇加入到BSA溶液中,4℃反应过夜,之后用PBS溶液透析即得;所述紫杉醇半琥珠酸酯、2-吗啉乙磺酸、N-羟基硫代琥珀酰亚胺的质量比为10:10:5。
5.根据权利要求1所述的用于快速检测紫杉醇的试纸,其特征在于,所述荧光微球兔IgG标记物由包括以下步骤的制备方法制得:将荧光微球溶液与2-吗啉乙磺酸溶液混匀,之后加入N-羟基硫代琥珀酰亚胺,再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐混匀后反应30min,之后离心10min,弃上清液后加入稀释后的兔IgG,超声重悬,反应4小时,然后加入BSA溶液封闭,混匀,搅拌反应0.5h小时,离心15min,弃去上清液,用微球储存液超声重悬,4℃保存。
6.一种如权利要求1所述的用于快速检测紫杉醇的试纸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)荧光标记物垫的制备:将荧光微球紫杉醇-BSA-生物素标记物用标记液稀释至0.1-1.0mg/ml,再加入0.2mg/ml的荧光微球兔IgG标记物,混匀后喷在玻璃纤维上,干燥即得;
2)在NC膜上分别包被紫杉醇抗体、链霉亲和素、羊抗兔IgG,干燥即得;
3)将样品垫、荧光微球标记物垫、NC膜、吸水纸依次粘贴于底板上,2mm重叠,压紧后3.8mm裁条,即得。
7.一种用于快速检测紫杉醇的试剂盒,其特征在于,包括卡壳和权利要求1所述的用于快速检测紫杉醇的试纸。
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