[发明专利]一种烷烃和多环芳烃降解复合菌剂及其制备方法

说明书

本发明涉及一种烷烃和多环芳烃降解复合菌剂及其制备方法。通过使用专用培养基对烷烃降解菌株台式戈登氏菌NR_61和多环芳烃降解菌株施氏假单胞菌ZJ‑7分别发酵；澄清型碟式离心机离心后获得菌体细胞；按比例在菌体细胞中依次加入糊精、高岭土、(NH₄)₂HPO₄、十二烷基磺酸钠后，获得的白色固体制剂即目的产品。本发明中的高效、环境友好的烷烃和多环芳烃降解复合菌剂对污染土壤中烷烃的降解率可达75%以上，多环芳烃（萘和菲）的降解率可达70%以上，具有经济环保、实施成本低、操作简便等优点。

一、技术领域：

本发明涉及一种烷烃和多环芳烃降解复合菌剂及其制备方法。

二、背景技术：

烷烃和多环芳烃是常见的有毒有害且难降解的有机污染物，严重危害生态环境和人体健康，石油泄漏、煤和石油等燃料的不完全燃烧、农田污水灌溉、大气沉降等是其主要来源。物理化学方法(化学氧化法、热力学修复法、隔离法、光催化法等)可以对烷烃和多环芳烃进行处理从而达到修复的目的，但是效果有限、费用高、易造成二次污染等限制了其应用。

三、发明内容

有鉴于此，本发明的提供一种烷烃和多环芳烃降解复合菌剂及其制备方法，其借助于微生物手段降解污染环境中的烷烃和多环芳烃，从而达到污染环境修复的目的。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种烷烃和多环芳烃降解复合菌剂的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：

步骤一：单菌发酵

(1)将液体发酵培养基A的pH值调节至7.4-7.6，按照常规操作进行无菌处理，按液体质量8％-10％无菌操作接入台式戈登氏菌NR_61，恒温25±1℃，搅拌速度280-320rpm，通风量0.3-0.5M³/min，罐压0.070-0.085MPa，持续发酵75-82h后，通过血球计数板进行活菌计数，菌数达到1.0×10⁸个/mL以上时终止发酵，

所述液体发酵培养基A的配方如下：蔗糖15-20g/L、蛋白胨1.8-2.0g/L、Na₂HPO₄1.5-2.0g/L、KH₂PO₄ 3.5-3.8g/L、(NH₄)₂SO₄ 4.0-4.5g/L、MgSO₄·7H₂O0.7-1.0g/L、CaCl₂·2H₂O 0.05-0.10g/L、FeSO₄·7H₂O 0.05-0.10g/L、柠檬酸三钠0.5～0.8g/L、余量水；

(2)将液体发酵培养基B的pH值调节至7.0-7.2，按照常规操作进行无菌处理，按液体质量5-8％无菌操作接入施氏假单胞菌ZJ-7，恒温35±1℃，搅拌速度250-280rpm，通风量0.25-0.35M³/min，罐压0.035-0.055MPa，持续发酵68-72h后，通过血球计数板进行活菌计数，菌数达到2.0×10⁹个/mL以上时终止发酵，

所述液体发酵培养基B的配方如下：