[发明专利]含有枯草芽胞杆菌B2-3-2和枯草芽胞杆菌B19的复合菌剂及其应用

说明书

一种含有枯草芽胞杆菌B2‑3‑2和枯草芽胞杆菌B19的复合菌剂及其应用，枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)B2‑3‑2，于2017年12月21日保藏于北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC No.15114，枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)B19，于2017年12月21日保藏于北京中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC No.15113，复合菌剂以液体或固体型式按常规方法混合制成，1mL液体复合菌剂中含4.8～5.2×10⁸cfu枯草芽胞杆菌B2‑3‑2、含4.8～5.2×10⁸cfu枯草芽胞杆菌B19；1g固体复合菌剂中含2.48～2.52×10⁹cfu枯草芽胞杆菌B2‑3‑2、含2.48～2.52×10⁹cfu枯草芽胞杆菌B19。

技术领域

本发明属于微生物肥料技术领域，具体涉及到枯草芽胞杆菌B2-3-2和枯草芽胞杆菌B19复合菌剂。

背景技术

随着可耕土地减少和设施栽培的发展，作物连作不可避免。但随之而来的连作障碍造成作物大面积减产甚至绝收。土传真菌病害和根结线虫危害是作物连作障碍的重要原因，生物防治在控制植物土传真菌病害和根结线虫危害方面具有重大的潜力。

微生物肥料简称菌肥，是指含有特定微生物活体的制品，应用于农业生产，通过其中所含微生物的生命活动，增加植物养分的供应量或促进植物生长，提高产量，改善农产品品质及农业生态环境。

微生物肥料包括微生物菌剂(即微生物接种剂)、生物有机肥和复合微生物肥料。过量施用化肥对土壤物理、化学及生物的变化、对地下水、农产品品质带来的问题已引起人们极大的关注。作物连作及解决连作障碍需要微生物肥料，农产品质量安全也需要微生物肥料，增施有机肥、菌肥已成为人们的共识。

微生物肥料可以增加土壤养分，改变土壤养分的存在状态利于作物吸收，产生多种活性物质促进作物生长，增强作物的抗病、抗虫和抗旱能力，土壤环境净化和土壤修复，参与土壤有机物降解、促进秸秆腐熟，改善农产品品质，提高农产品产量。

多菌种复合是当今菌肥领域广泛采用的技术。不同的菌种有不同的功能，不同功能的菌种复合，功能可以互补，但不是菌种越多越好。多菌种复合要考虑微生物之间的相互关系，生物之间的相互关系有共处、互生、共生、寄生、拮抗、竞争、捕食7种。菌种复合要求菌种之间要共处、互生、共生，不能是寄生、拮抗、竞争、捕食。多菌种复合还要考虑微生物的增代时间(繁殖一代所需要的时间)，相差太大，使用过程中繁殖慢的就丢失了。多菌种复合也要考虑生产设备数量的可行性。

某些细菌生长到后期，在其菌体内形成厚壁，折光性强，具有抗逆性的休眠体称为芽胞。由外到内结构依次为芽胞外壁－芽胞衣－皮层－核心，芽胞核心又分为芽胞壁，芽胞膜，芽胞质，芽胞核区。芽胞不是细菌的繁殖型。芽胞具有极强的抗热，抗辐射，抗化学药物和抗静水压，抗干燥等能力。用芽胞杆菌生产的菌肥产品保质期长，对化肥、农药和除草剂有一定的耐受性。

依据植物病原真菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和南方根结线虫(Meloidogyne incongnita(KofoldWhite)Chitwood)与植物、动物及人体在细胞结构及组成方面的差异，以作用于植物病原真菌和南方根结线虫细胞的特异成分为靶位，筛选抗植物病原真菌和根结线虫而对植物、动物及人体安全的芽胞杆菌用做生产微生物肥料的菌种，且这些菌种防病、抗虫效果明显，将具有重要的理论和实际意义。

几丁质是植物病原真菌细胞壁的组成成分，也是根结线虫卵壳的组成成分，研究证实几丁质酶可以破坏南方根结线虫的虫卵，而对其有明显的防治效果。根结线虫二龄幼虫的体壁主要是由各类蛋白质、纤维交联而成，破坏二龄幼虫的体壁也可以杀死根结线虫。因此筛选蛋白酶高酶活菌株用于生物防治具有一定的研究意义。