[发明专利]一种Pd@Ag@CeO2

说明书

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器的制备方法及应用。本发明利用CeO₂包覆双金属Pd@Ag纳米粒子作为催化材料，与检测抗体孵化后作为标记物，同时利用金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球作为电极修饰材料，成功构建了夹心型免疫传感器，从而实现了对肿瘤标志物CA199、CA125的检测，具备灵敏度高，特异性强，检测限低的优势，对肿瘤的早期检测具有重要的科学意义和应用价值。

技术领域

本发明属于纳米功能材料、免疫分析以及生物传感技术领域，涉及一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器的制备方法及应用。具体是采用Pd@Ag@CeO₂为检测抗体标记物，实现了对肿瘤标志物CA199、CA125的灵敏检测。

背景技术

随着工业化进程的加快，肿瘤的发病率呈现出不断增加的趋势。肿瘤几乎在人体各个器官、组织皆可出现,但在早期不易察觉，并且肿瘤的生长和转移的速度快，严重威胁人们健康和生命。肿瘤标志物在肿瘤的辅助诊断、疗效监测、预后判断等方面发挥了重要作用。因此，降低肿瘤死亡率的主要途径是实现早期对肿瘤标志物的灵敏检测。目前，对于肿瘤标志物的检测方法有很多，如酶联免疫法，放射免疫法，时间分辨荧光法等，但这些方法在环保防护、操作速度、定量检测等方面各有不足之处，因此，发明一种特异性强，灵敏度高，检测速度快，操作简便的免疫传感器十分重要。

电化学免疫传感器依靠抗原与其相应抗体的特异性结合，已经广泛应用于各种肿瘤标志物的检测，一般可分为夹心型免疫传感器和无标记型免疫传感器。夹心型电化学免疫传感器结合了高灵敏的传感技术和高特异的免疫反应，具有检测快速、分析灵敏度高、特异性强、使用简便且成本低等优点，已广泛应用于环境监测、食品安全控制、生物监测、临床检验等领域。

金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球具有大的比表面积和良好的生物相容性，可以显著提高捕获Ab₁的固载量；良好的电子传递能力可以增强电极的导电性。Pd@Ag@CeO₂能够提供良好的协同催化作用，同时CeO₂作为保护层可以有效地保护贵金属，减少贵金属的团聚作用。本发明采用金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球作为基底材料，Pd@Ag@CeO₂作为催化材料与检测抗体进行孵化作为标记物，构建了用于肿瘤标志物检测的夹心型电化学免疫传感器。

发明内容

本发明提供了一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器的制备方法及应用，实现了对肿瘤标志物的灵敏检测。

本发明的目的之一是提供一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器的制备方法。

本发明的目的之二是将所制备的基于Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器应用于肿瘤标志物的高灵敏、特异性检测。

本发明的技术方案，包括以下步骤。

1. 一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器的制备方法，步骤如下：

（1）将直径为4 mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉打磨成镜面，超纯水清洗干净；

（2）取6 µL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球分散液滴涂到电极表面，室温下晾干，超纯水冲洗电极表面，晾干；

（3）将6 µL、8 ~ 12 µg/mL的肿瘤标志物捕获抗体Ab₁滴加到电极表面，超纯水冲洗，4°C冰箱中干燥；

（4）继续将3 µL、0.5 ~ 1.5 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干；