[发明专利]一种Pd@Ag@CeO2

权利要求书

1.一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）将直径为4 mm的玻碳电极用Al₂O₃抛光粉打磨成镜面，超纯水清洗干净；

（2）取6 µL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球分散液滴涂到电极表面，室温下晾干，超纯水冲洗电极表面，晾干；

（3）将6 µL、8 ~ 12 µg/mL的肿瘤标志物捕获抗体Ab₁滴加到电极表面，超纯水冲洗，4 °C冰箱中干燥；

（4）继续将3 µL、0.5 ~ 1.5 mg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干；

（5）滴加6 µL、0.1pg/mL ~ 100 ng/mL的一系列不同浓度的肿瘤标志物抗原溶液，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干；

（6）将6 µL、1.5 ~ 3.5 mg/mL检测抗体孵化物Pd@Ag@CeO₂-Ab₂溶液滴至电极表面，置于4 °C冰箱中孵化40 min，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干，制得一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器。

2.如权利要求1所述的一种Pd@Ag@CeO₂标记的免疫传感器的制备方法，所述金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球分散液的制备，步骤如下：

（1）金纳米粒子溶液的制备

在300 mL的三口烧瓶中加入1 ~ 3 mL、质量分数为1%的氯金酸和99 mL超纯水；100 °C油浴加热，溶液开始沸腾时加入1.5 ~ 3.5 mL、质量分数为1%的柠檬酸钠溶液，回流10 ~30 min，冷却至室温，得到酒红色的金纳米粒子溶液；

（2）微孔碳球的制备

在烧杯中加入40 mL超纯水，16 mL无水乙醇，0.2 mL的质量分数为25 %的氨水，搅拌10~ 30 min；依次加入0.4 ~ 0.8 g苯酚、0.50 ~ 0.70 mL、质量分数为37%的甲醛溶液，转移到30 °C恒温水浴中，在搅拌条件下反应24 h；将溶液转移到聚四氟乙烯高压釜中，100 °C下反应24 h，离心洗涤，所得固体产物在40 °C真空干燥箱中干燥24 h；干燥好的固体与KOH按质量比4:1混合，研磨1 h，进行活化，将活化后的固体放入管式电阻炉内在氮气的保护下进行碳化；碳化后的固体用10 %的盐酸浸泡1 h，离心洗涤，40 °C的真空干燥箱中干燥24h，制得的微孔碳球；

所述碳化，具体步骤如下：管式电阻炉采用程序升温控制，以1 °C/min的速度升温到350 °C，保持1 h；再以2 °C/min升温到700 °C，保持2 h，后冷却至室温；

（3）金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球分散液的制备

在300 mL的三口烧瓶中加入0.1 ~ 0.3 g微孔碳球和10 ~ 30 mL无水乙醇，超声震荡30 min，用微量移液枪准确量取0.1 ~ 0.3 mL的3-氨丙基三乙氧基硅烷加入三口烧瓶中，70 °C搅拌加热1.5 h，得到氨基功能化微孔碳球的悬浊液,然后取10 mL金纳米粒子溶液加入上述悬浊液中持续震荡30 min，无水乙醇离心洗涤，在40 °C的真空干燥箱中干燥24 h，制得金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳粉末；

取10 ~ 30 mg金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳粉末，超声分散于10 mL的超纯水中，制得金纳米粒子负载氨基功能化微孔碳球分散液，放置在4 °C的冰箱中，备用。