[发明专利]一种检测系统有效
申请号: | 201810295089.7 | 申请日: | 2018-04-04 |
公开(公告)号: | CN108732359B | 公开(公告)日: | 2020-09-15 |
发明(设计)人: | 曹佳莉;袁权;张天英;赵菁华;张军;夏宁邵 | 申请(专利权)人: | 厦门大学 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569;C07K14/435;C07K16/18 |
代理公司: | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人: | 林远成 |
地址: | 361005 福建*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 系统 | ||
1.一种试剂盒,其包含两种组分,即,第一组分和第二组分,其中,所述第一组分包含:
(a1)荧光蛋白的截短体,其与荧光蛋白的差异在于,荧光蛋白的C端被截短9-23个氨基酸残基;其中,所述荧光蛋白为绿色荧光蛋白或其他颜色的荧光蛋白,并且,所述其他颜色的荧光蛋白与所述绿色荧光蛋白的区别在于参与激发荧光的结构域不同;
(a2)如(a1)中定义的截短体的变体,所述变体与所述截短体的差异在于不超过14个氨基酸残基的置换;或
(a3)核酸分子,其包含编码如(a1)中定义的截短体或如(a2)中定义的变体的核苷酸序列;
并且,所述第二组分包含:
(b1)抗荧光蛋白的单域抗体,其包含选自下列的CDR1、CDR2和CDR3:
(1)分别如SEQ ID NO:47-49所示的CDR1、CDR2和CDR3;
(2)分别如SEQ ID NO:50-52所示的CDR1、CDR2和CDR3;
(3)分别如SEQ ID NO:53-55所示的CDR1、CDR2和CDR3;
(4)分别如SEQ ID NO:56-58所示的CDR1、CDR2和CDR3;
(5)分别如SEQ ID NO:59-61所示的CDR1、CDR2和CDR3;
(6)分别如SEQ ID NO:62-64所示的CDR1、CDR2和CDR3;
(7)分别如SEQ ID NO:65-67所示的CDR1、CDR2和CDR3;
(8)分别如SEQ ID NO:68-70所示的CDR1、CDR2和CDR3;和
(9)分别如SEQ ID NO:71-73所示的CDR1、CDR2和CDR3;或
(b2)核酸分子,其包含编码如(b1)中定义的单域抗体的核苷酸序列;
其中,所述截短体和所述变体在游离状态下不发出荧光,但是在与所述单域抗体结合后,能够发出荧光。
2.权利要求1的试剂盒,其中,所述荧光蛋白选自绿色荧光蛋白,蓝色荧光蛋白和黄色荧光蛋白。
3.权利要求2的试剂盒,其中,所述绿色荧光蛋白具有如SEQ ID NO:84所示的氨基酸序列;和/或,所述蓝色荧光蛋白具有如SEQ ID NO:85所示的氨基酸序列;和/或,所述黄色荧光蛋白具有如SEQ ID NO:86所示的氨基酸序列。
4.权利要求1的试剂盒,其中,所述截短体为绿色荧光蛋白的截短体,并且其与绿色荧光蛋白的差异在于,绿色荧光蛋白的C端被截短9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、或23个氨基酸残基;或者,所述截短体为蓝色荧光蛋白的截短体,并且其与蓝色荧光蛋白的差异在于,蓝色荧光蛋白的C端被截短9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、或23个氨基酸残基;或者,所述截短体为黄色荧光蛋白的截短体,并且其与黄色荧光蛋白的差异在于,黄色荧光蛋白的C端被截短9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、或23个氨基酸残基。
5.权利要求4的试剂盒,其中,所述绿色荧光蛋白的截短体具有如SEQ ID NO:31所示的氨基酸序列。
6.权利要求1的试剂盒,其中,所述置换为保守置换。
7.权利要求1的试剂盒,其中,所述截短体或所述变体具有选自下列的氨基酸序列:SEQID NO:31-46。
8.权利要求1的试剂盒,其中,所述单域抗体包含重链可变区,所述重链可变区具有选自下列的氨基酸序列:SEQ ID NO:1-9和87-88。
9.权利要求8的试剂盒,其中,所述单域抗体由所述重链可变区组成,或者包含所述重链可变区,以及任选的铰链区、Fc区、或重链恒定区。
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