[发明专利]检测力生长因子、其E肽的直接化学发光试剂盒、制法

说明书

本发明涉及一种检测力生长因子、其E肽的直接化学发光试剂盒、制法，制备的试剂盒包括：链霉亲和素偶联的磁性微粒工作液，生物素标记的MGF和/或MGF‑Ct24E抗体工作液，化学发光标记物标记的MGF和/或MGF‑Ct24E抗体工作液，MGF和MGF‑Ct24E校准品和/或质控品工作液，化学发光底物液，清洗液，试剂盒的发光体系为直接化学发光，利用链霉亲和素‑生物素信号放大系统，检测灵敏度高、线性范围宽，检测结果重复性好，可以实现力生长因子和/或其E肽的准确定量。

技术领域

本发明涉及一种检测力生长因子和/或其E肽的直接化学发光试剂盒及用法，属于免疫分析技术领域。

背景技术

力生长因子(MGF)最初在拉伸刺激的骨骼肌中被发现，是肌肉在力刺激诱导下，由胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因选择性剪接产生的重要变构体，选择剪接发生在IGF-Ⅰ基因外显子6之前的位点，而MGF在外显子5这一区域，人类和啮齿动物类分别插入了49bp和52bp，导致外显子6的翻译发生移码突变，产生特异的C端24个氨基酸的E肽序列(MGF-Ct24E)。

MGF及MGF-Ct24E能够激活肌肉卫星细胞，促进组织再生，促进成骨细胞增殖，在成骨细胞或骨组织对应力刺激以及神经、肌肉组织对损伤的响应中发挥作用，对成熟运动神经元的维持也有着重要作用，具有促进多种细胞增殖和存活的作用。还有研究发现，MGF及MGF-Ct24有助于改善记忆。

通过对C-末端和/或N-末端进行化学修饰，如聚乙二醇化、L-D型氨基酸转化、糖基化、硫酸化、酰胺化、乙酰化等方法修饰MGF，可增加MGF的稳定性，修饰后的MGF及MGF-Ct24E可制成药物制剂，如水性和非水性无菌注射液、水性和非水性无菌悬液，制剂可通过皮肤、肠胃外、肌肉、皮下或经皮肤等方式给药，或者通过直接注射到血液中或直接施用至粘膜组织给药，用来治疗骨骼肌障碍、心肌障碍、神经障碍等多种疾病。

MGF及MGF-Ct24E可以应用到组织工程领域，通过合适的方式与改性的聚乳酸材料连接制备生物活性仿生材料，用于骨再生修复、血管再生修复等。另外，MGF及MGF-Ct24E可以通过合适的方式负载到镁合金表面，植入体内及时释放从而刺激成骨细胞的增长，来克服应力不足引起的问题。

MGF及MGF-Ct24E的应用如此广泛，如何检测骨细胞或骨组织受到应力刺激或神经、肌肉组织受到损伤时是否有MGF及MGF-Ct24E产生，如何监控制剂在体内代谢程度以便于制定治疗/给药方案，如何监测仿生材料中MGF及MGF-Ct24E的释放速度，这些都是需要迫切解决的问题。然而，现有技术中仅有蛋白质免疫印迹法检测MGF及MGF-Ct24E，而该蛋白质免疫印迹检测只是定性的分析，不能定量，且速度较慢，目前尚未有快速、准确地定量检测MGF及MGF-Ct24E的方法或试剂盒。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：为解决现有技术中尚未有快速、准确地定量检测MGF及MGF-Ct24E的方法或试剂盒的技术问题，提供一种检测力生长因子、其E肽的直接化学发光试剂盒及制法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种检测力生长因子、其E肽的直接化学发光试剂盒，包括：链霉亲和素偶联的磁性微粒工作液，生物素标记的MGF和/或MGF-Ct24E抗体工作液，化学发光标记物标记的MGF和/或MGF-Ct24E抗体工作液，化学发光底物液，清洗液。

优选地，所述MGF和/或MGF-Ct24E抗体为单克隆抗体、多克隆抗体、单克隆抗体Fab片段或多克隆抗体Fab片段，优选来源于鼠、兔、羊。