[发明专利]一套评价杀菌剂对薯苗黑斑病防治效果的方法

说明书

本发明公开了一套评价杀菌剂对薯苗黑斑病防治效果的方法，该方法的接种方法——土壤或其它基质材料混合甘薯黑斑病菌分生孢子悬浮液接种，和培养方法——培养箱或人工气候室，最大限度的模拟大田薯苗的生长条件，能够保证各处理薯苗感病均匀，可满足评价杀菌剂防治效果的条件。同时又能够做到所有试验条件可调可控，与大田试验相比极大提高了试验的成功率、准确率，并缩短了试验周期，大幅改善了传统室内生测结果与实际应用结果差异巨大的弊端。本发明对薯苗感病严重度的分级是通过大量调查总结出来的，符合盆栽接种的实际情况。特别是创新的将薯苗茎段和末端伤口感病进行独立的分级和评价，对综合评价药剂的防治效果有重要的促进作用。

技术领域

本发明涉及农用杀菌剂的效果评价技术，具体涉及一套评价杀菌剂对薯苗黑斑病防治效果的方法。

背景技术

甘薯黑斑病在世界各甘薯产区均有发生，在我国薯区发生普遍且危害严重。每年由该病造成的甘薯产量损失为5％-10％，危害严重时造成损失为20％-50％，甚至更高(中国农作物病虫害(第三版).北京：中国农业出版社，2015，848)。此外，病薯可产生甘薯黑疱霉酮(ipomeamarone)等呋喃萜类有毒物质，人和家畜使用后，可引起中毒，甚至死亡。

土壤带菌和病健混种等原因可引起健康薯苗的感病，而薯苗移栽大田后如果感病，会造成死苗和生长不良，还会侵染新结薯块产生病薯，导致在运输和储藏过程中健薯染病，而且为病原更大范围传播创造了条件。我国大部分地区均适合甘薯生产，随着地区间种苗频繁调运，种植大户专业种植规模扩大，重茬种植面积扩大，病害感染的风险越来越大。保护健康薯苗不被甘薯黑斑病菌侵染十分重要。

在药剂防治薯苗黑斑病方面，主要采取药剂浸苗的方式施药。而目前正式登记防治甘薯黑斑病的杀菌剂只有甲基硫菌灵、多菌灵、代森铵、乙蒜素四种，且施药方式绝大多数为浸薯块，少量的施药方式为浸种，没有正式登记处理薯苗的药剂和处理方法。药剂种类少和施药技术研究的匮乏是薯苗黑斑病防治中存在的突出问题。

筛选适用的杀菌剂是提高薯苗黑斑病防治水平的重要手段，常规的杀菌剂筛选方法主要包括室内筛选和大田试验两大类。甘薯黑斑病防治药剂室内筛选使用最多的是菌丝生长抑制法，主要步骤是制备含药培养基，接种菌饼至含药培养基，通过计算不同浓度杀菌剂对菌饼菌丝生长的抑制作用来评价筛选杀菌剂。由于甘薯黑斑病致病菌的分生孢子在水中萌发率低，直至最近甘薯长喙壳分生孢子促萌发技术建立，孢子萌发法才开始应用于甘薯黑斑病防治药剂筛选(张德胜等，中国生物防治学报，2017,33(5)：681-685)。另一种室内筛选防治甘薯黑斑病药剂的方法为水培薯苗结合人工接种技术。室内筛选虽然简单便捷，条件易于控制，但与病害侵染过程中的环境、寄主条件差异巨大，经常出现室内生测结果与大田试验结果不符的情况。大田防治试验可以对药剂、环境和寄主相互作用下的防治效果进行评价，可用来验证室内筛选的结果，是筛选杀菌剂的重要环节。但大田试验不可控因素较多，试验周期长，成本高，且有一定失败率，结果不稳定。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一套评价杀菌剂对薯苗黑斑病防治效果的方法，该方法能够最大限度的模拟薯苗在大田的生长环境，能够控制病原菌的接种强度，全面的评价药剂对薯苗地下茎段和伤口的保护作用。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一套评价杀菌剂对薯苗黑斑病防治效果的方法，将土壤或其它基质材料用常规方法消毒灭菌后作为盆栽基质，用无菌水润湿，将病原菌的分生孢子悬浮液均匀混入润湿后的盆栽基质中，装入底部有孔的营养钵；将待测杀菌剂制成不同浓度的药液，把剪下的新鲜薯苗插入药液进行浸苗处理后扦插进营养钵，得到盆栽薯苗；随后将盆栽薯苗置于培养箱或人工气候室进行培养；培养一段时间后调查薯苗茎段和末端伤口的感病情况，评价杀菌剂对薯苗黑斑病的防治效果。

土壤为农田表层土壤，其它基质材料为市售蛭石和草炭土的混合物，蛭石和草炭土的体积比为1:1。