[发明专利]三七中皂苷的薄层扫描测定方法

说明书

本发明公开了一种三七中皂苷的薄层扫描测定方法，该方法包括以下步骤：(1)混合对照品溶液的配制；(2)供试品溶液的制备；(3)线性关系的考察；(4)皂苷含量测定。本发明通过大量实验筛选出薄层扫描法，本发明可同时测定三七细粉中人参皂苷Rg1、三七皂苷R1，人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的含量，本发明通过大量实验筛选供试品溶液的制备、展开条件和显色方法等，使人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的色谱斑点分离良好，扫描色谱峰稳定、可测，检测速度快，且成本低，可克服现有技术HPLC存在的末端吸收，灵敏度低，检测成本高的缺点。

技术领域

本发明涉及一种中药的质量检测方法，具体涉及一种三七中皂苷的薄层扫描测定方法。

背景技术

三七为五加科人参属植物三七的块根。三七自古以活血散瘀功效著名，能抗血小板聚集和抗血栓形成，现代药理研究表明三七对心、脑血管等血液系统、神经系统、代谢和免疫系统具有很好的调节作用。三七有效物质为皂苷类化合物，迄今已从三七中分离得到70余种三萜皂苷，其中以三七皂苷R1，人参皂苷Rb1，Rg1和Re等含量较高。

目前人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re和Re的定量测定方法多采用HPLC法，但因其为末端吸收，灵敏度低，测定时间长，且检测成本高、速度慢，限制了HPLC法在检测三七皂苷活性成分中的应用。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，经过大量实验筛选，采用薄层扫描法测定三七中皂苷类化合物。该方法检测灵敏度高，稳定性好，检测速度快，成本低，可以同时检测三七中4种以上三七皂苷的有效成分，对控制三七的质量和保证疗效具有重要意义。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种三七中皂苷的薄层扫描测定方法，包括以下步骤：

(1)混合对照品溶液的配制

取人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re对照品适量，分别精密称定，置于容量瓶中，加甲醇制成混合对照品溶液，备用；

(2)供试品溶液的制备

取三七细粉，置索式提取器中，加乙醚加热回流提取，弃去乙醚液，药渣挥去溶剂，加甲醇加热回流至无色，提取液挥干，残渣加甲醇适量，并转移至量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，作为供试品溶液，备用；

(3)线性关系的考察

精密吸取上述步骤(1)不同体积的混合对照品溶液，分别点于薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，晾干，至366nm下检视后，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶带固定，按薄层扫描法进行扫描，测得对照品吸收度积分值，以人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re进样量为横坐标X，峰面积积分值为纵坐标Y，进行线性回归，得到回归方程；

(4)含量测定

精密吸取步骤(2)的供试品溶液，点于硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，晾干，至366nm下检视后，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶带固定，按薄层扫描法进行扫描，测得供试品吸收度积分值，然后根据步骤(3)回归方程计算人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量。

作为优选方案，以上所述的三七中皂苷的薄层扫描测定方法，步骤(1)混合对照品溶液的配制：取人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和人参皂苷Re对照品适量，分别精密称定，置于25mL容量瓶中，加甲醇制成浓度分别为0.504mg/ml、0.501mg/ml、0.492mg/ml、0.498mg/ml混合对照品溶液，备用。