[发明专利]PET水解酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 201810210477.0 | 申请日： | 2018-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN108467857B | 公开（公告）日： | 2020-11-03 |
| 发明（设计）人： | 罗云孜;包锐;刘兵;何利惠 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12N9/14 | 分类号： | C12N9/14;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P7/18;C12P7/44 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 张娟;刘华玲 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | pet 水解 突变体 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1. 一种PET水解酶突变体，其特征在于：它的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示。
2.一种编码PET水解酶突变体的基因，其特征在于：
它的序列如SEQ ID NO：7所示。
3. 一种重组载体，其特征在于：它包含SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列；所述的重组载体是原核载体。
4.如权利要求3所述的重组载体，其特征在于：所述原核载体为pET21b载体。
5.一种重组菌，其特征在于：它包含权利要求3或4所述的重组载体。
6. 如权利要求5所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为大肠杆菌
7.一种制备权利要求1所述PET水解酶突变体的方法，其特征在于：包含如下步骤：
a、取权利要求5或6所述的重组菌，接种到LB培养基上，振荡培养至OD600为0.8-1.0时，用IPTG进行诱导培养；
b、离心，取沉淀，分离纯化，即可。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：
所述诱导培养的条件为：0.1mM IPTG，16℃下，220rpm，培养18h；
所述分离纯化时，依次使用Ni亲和层析柱、Resource S离子交换柱及凝胶层析柱纯化蛋白。
9.权利要求1所述PET水解酶突变体在制备PET降解剂中的用途。
10.一种PET降解剂，其特征在于：它含有权利要求1所述的PET水解酶突变体。
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