[发明专利]一种来源于福建金线莲的焦磷酸合酶基因

说明书

本发明提供一种来源于福建金线莲的焦磷酸合酶基因，涉及基因工程技术领域。一种来源于福建金线莲的焦磷酸合酶基因，其具有如SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列，如SEQ ID NO.2所述的氨基酸序列。该序列是一种新的焦磷酸合酶基因序列，是人们在除了兰科植物的铁皮石斛外一种新的兰科植物扩增焦磷酸合酶基因。其对研究福建金线莲中特定的目的次生代谢产物富集的基础，具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，且特别涉及一种来源于福建金线莲的焦磷酸合酶基因。

背景技术

福建金线莲(Aoectochilus formosanus)是多年生草本植物，生长在福建地区，属兰科开唇兰属金线莲种。福建金线莲中重要药理活性的物质主要为：黄酮类化合物，甾体类化合物，三萜类化合物，糖类成分，生物碱，强心甙类，酯类，牛磺酸，多种氨基酸，微量元素及无机元素等。在民间素有“药王”、“金草”、“神草”、“鸟人参”等美称。其中，福建金线莲中的多糖、黄酮类化合物、甾体等被认为是重要的活性物质，这些物质的合成直接影响了福建金线莲的药用价值。解析次生代谢产物的合成途径是开展相关合成生物学研究的前提和基础。

法呢基焦磷酸合酶(Farnesyl-diphosphate synthase)是活性物质合成代谢途径中关键的酶之一。FPS是一个主要的链延长酶，FPS依次催化DMPP，C5，C10的碳氢部分，生成异戊烯基焦磷酸(IPP)和C5来合成E-法尼基焦磷酸(FPP)。FPS是分支点关键酶引导碳以及前提的流向。MVA和MEP途径里的FPS均可催化合成FPP，为后续产物提供合成前体。对福建金线莲中甾体代谢合成焦磷酸合酶(FPS)基因的克隆的研究，是研究福建金线莲中特定的目的次生代谢产物富集的基础，具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种来源于福建金线莲的焦磷酸合酶基因、此基因编码的蛋白质以及含有此基因的重组质粒，为金线莲中甾体代谢合成提供基础。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

一种源于福建金线莲的焦磷酸合酶基因，所述焦磷酸合酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

含有上述焦磷酸合酶基因的重组质粒。

可选的，所述质粒为pMD18-T、pBI121或pMD19-T。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明所提供的焦磷酸合酶基因是首次从福建金线莲中克隆制得得到的。甾体是金线莲中主要的活性物质之一。焦磷酸合酶基因是金线莲甾体合成途径中的关键酶基因。该基因的成功克隆，为金线莲品种选育提供重要依据，也为甾体富集的转基因金线莲株系研究提供基础。利用本发明可以对金线莲植物进行基因工程改造，通过转基因提高植物体内的甾体等成分，或者是利用该基因进行植物品种鉴定、筛选等，得到高甾体含量的植物品种等，为金线莲中特定的目的次生代谢产物富集的提供基础。同时在福建金线莲中克隆FPS基因，是研究福建金线莲中甾体合成代谢通路的基础，能够为金线莲品种选育提供重要的依据，也为甾体富集的转基因株系研究提供基础。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实施例4提供的福建金线莲FPS基因CDS序列电泳检测结果图，其中，1为引物FPSF\FPSR扩增片段电泳结果；

图2为本发明实施例5的福建金线莲FPS预测的蛋白三级结构图；

图3为本发明实施例5的福建金线莲FPS蛋白发生关系树分析；

图4为本发明实施例6的福建金线莲FPS基因不同组织表达模式图；