[发明专利]一种生物大分子上游分阶段截留的生产方法、生产模块及在生产中的应用

权利要求书

1.一种生物大分子上游分阶段截留的生产方法，包括使用生物反应器结合截留系统的生产方式，其特征在于，所述方法包含以下生产阶段：

第一生产阶段，使用包含第一过滤模块的截留系统，所述的第一过滤模块包含有滤孔为0.1μm-0.5μm的过滤组件；细胞培养密度达到10 ± 5× 10⁶细胞数/毫升时，启动该第一生产阶段；

第二生产阶段，使用包含有第二过滤模块的截留系统，所述的第二过滤模块包含有滤孔的截留分子量相对于产物分子量1/5～1/3的过滤组件；细胞密度不低于35 ± 5 × 10⁶细胞数/毫升，启动该第二生产阶段。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的第一过滤模块包含有滤孔为0.2μm-0.3μm的过滤组件。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的第一过滤模块包含有滤孔为0.2μm的过滤组件。

4.如权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述产物的分子量为50～300KD。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述产物的分子量为100～250KD。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的产物分子量在150～200KD。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的第二生产阶段的细胞培养密度的波动范围不高于10 × 10⁶细胞数/毫升或所述的第二生产阶段的细胞培养密度呈递增趋势，其波动范围高于10 × 10⁶细胞数/毫升。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的截留系统选自交替式切向流系统、切向流过滤系统、旋转过滤系统、深层过滤系统、离心机系统或沉降系统。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生物反应器选自气升式生物反应器、机械搅拌式生物反应器、鼓泡塔式生物反应器、膜生物反应器。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的细胞选自哺乳动物细胞、植物细胞、昆虫细胞和微生物细胞。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述的细胞为哺乳动物细胞。

12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，生物大分子上游生产的生产工艺选自灌注培养、补料批次培养。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述灌注培养为浓缩灌注培养。

14.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述补料批次培养为浓缩补料批次培养。

15.如权利要求1-3、5-14的任一所述的方法，其特征在于，所述方法应用于生物大分子上游生产的过程中，其中所述的生物大分子为蛋白产物。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述的生物大分子为多肽或重组蛋白。

17.如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的重组蛋白为基因工程抗体或具有生物学活性的功能蛋白和Fc段融合而成的蛋白。