[发明专利]耐高温温敏型细胞培养介质材料及其制备方法有效
申请号: | 201810140945.1 | 申请日: | 2018-02-11 |
公开(公告)号: | CN108486034B | 公开(公告)日: | 2021-05-28 |
发明(设计)人: | 蔡海波;童煜栋;张伟安;张远豪;谭文松 | 申请(专利权)人: | 华东理工大学 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;C08F283/12;C08F283/06;C08F220/54 |
代理公司: | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 | 代理人: | 翟羽;曾人泉 |
地址: | 200237 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 耐高温 温敏型 细胞培养 介质 材料 及其 制备 方法 | ||
1.一类耐高温温敏型细胞培养介质材料,其特征在于,其组分及组分的浓度范围为:
温敏性聚合物单体N-异丙基丙烯酰胺:浓度范围为10w/v%~20w/v%;
生物相容性单体甲基丙烯酸(寡聚(乙二醇)):浓度范围为0.9w/v%~2.7w/v%;
交联剂八甲基丙烯酸酯基笼型倍半硅氧烷:浓度范围为1w/v%~3w/v%;
光引发剂Irgacure 2959:浓度为0.4w/v%;
溶剂为1,4-二氧六环。
2.如权利要求1所述的耐高温温敏型细胞培养介质材料的制备方法,其特征在于,包含以下步骤:
(1)在1mL的1,4-二氧六环溶剂中,加入100~200mg的N-异丙基丙烯酰胺,使其浓度为10w/v%~20w/v%;加入9~27mg的甲基丙烯酸(寡聚(乙二醇)),使其浓度为0.9w/v%~2.7w/v%;加入10~30mg的八甲基丙烯酸酯基笼型倍半硅氧烷,使其浓度为1w/v%~3w/v%;加入4mg的Irgacure 2959,使其浓度为0.4w/v%,于25℃的环境温度下搅拌10分钟,形成完全透明的预聚液;
(2)将步骤(1)获得的预聚液注入聚四氟乙烯模具中,用表面洁净的盖玻片进行液封,在功率为8mW/cm2的365nm的紫外灯下照射30分钟使其形成凝胶;
(3)将步骤(2)获得的凝胶从模具中取出,转移到1,4-二氧六环中溶胀2~3天,期间多次更换溶剂1,4-二氧六环,去除未反应的单体和交联剂;
(4)将去除了未反应单体和交联剂的凝胶转移至磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,用水替换凝胶网络中的1,4-二氧六环,获得温敏型水凝胶材料;所述温敏水凝胶材料经酒精灭菌和121℃、30分钟高温灭菌不发生降解,能作为耐高温温敏型细胞培养介质材料。
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