[发明专利]DNA液晶生物传感器及其制备方法和检测方法

权利要求书

1.一种DNA液晶生物传感器，其特征在于：包括捕获探针和隔离探针混合固定于表面镀有一层纳米级厚度金膜的玻片上而制成的工作片基，所述捕获探针由含有m个腺嘌呤A和与待检测物特异性识别结合的一段碱基序列P组成，并标记为A_mP₁；所述隔离探针含有n个腺嘌呤A的多聚腺嘌呤，并标记为A_n，所述m为正整数，所述n为自然数，所述捕获探针与隔离探针的浓度比y为7:5，此外还包括取向片基，所述取向片基上放置有铜载网，所述铜载网内注入有列向液晶。

2.根据权利要求1所述的DNA液晶生物传感器，其特征在于：所述捕获探针和隔离探针的总浓度x为3μmol/L。

3.根据权利要求1所述的DNA液晶生物传感器，其特征在于：所述m为15，n为15，所述碱基序列P的碱基数量为10～30个。

4.根据权利要求1所述的DNA液晶生物传感器，其特征在于：所述金膜包括3nm的铬粘附层和10nm金膜层。

5.一种权利要求1～4任一项所述的DNA液晶生物传感器的制备方法，包括工作片基的制备、取向片基的制备，其特征在于所述工作片基的制备为：

a、玻片镀金处理：在清洗后的玻片表面镀上一层厚度均匀的金膜得到镀金基底；

b、配制DNA探针固定液并制成工作片基：将捕获探针A_mP₁和隔离探针A_n溶于缓冲液中并混合制成DNA探针固定液，然后将DNA探针固定液固定于所述镀金基底上，制成工作片基；所述捕获探针A_mP₁的面密度通过所述DNA探针固定液的浓度、捕获探针与隔离探针的浓度比、m和n的值进行调节。

6.根据权利要求5所述的DNA液晶生物传感器的制备方法，其特征在于所述取向片基的制备为：将另一玻片清洗后并浸泡于液晶取向剂溶液中孵育，反应后经超纯水冲洗后吹干，再于烘箱中高温烘烤交联反应，经表面硅烷偶联处理后的液晶分子垂直取向，制成取向片基。

7.一种权利要求1～4任一项所述的DNA液晶生物传感器的检测方法，其特征在于：采用滴涂法将一定量的待测液滴加在所述工作片基表面，捕获探针与待测液中的目标检测物在室温下进行孵育反应，2h后用缓冲液、超纯水顺序冲洗，氮气吹干，再在所述取向片基上放置一铜载网，注入液晶，然后盖上经分子识别反应后的工作片基，最后，将取向片基和工作片基夹具固定，组成三明治结构的液晶盒，将所述液晶盒于偏光显微镜下观察并采集图像，通过图像的明暗程度及验收实现对待测液的半定量检测。

8.根据权利要求7所述的DNA液晶生物传感器的检测方法，其特征在于：所述液晶为向列相液晶，包括5CB、E7。