[发明专利]一种脂肪酶-磷酸钙复合酶晶体、其制备方法及其催化合成克林霉素棕榈酸酯的方法

说明书

本发明一种脂肪酶‑磷酸钙复合酶晶体、其制备方法及其催化合成克林霉素棕榈酸酯的方法，属于抗生素药物合成技术领域。所述方法以式I所示克林霉素游离碱和式II所示棕榈酸乙烯酯为底物，在脂肪酶‑磷酸钙复合酶晶体的催化作用下，与反应溶剂在30～80℃进行反应6～30h，制得式III所示克林霉素棕榈酸酯。用于上述方法的一种脂肪酶‑磷酸钙复合酶晶体，所述脂肪酶‑磷酸钙复合酶晶体为疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的磷酸钙晶体。本发明具有以下有益效果：方法成本少，固定化酶不溶于有机溶剂，可多次循环使用，收率最高可达75.8％，安全可靠且环境污染少，适合于工业化生产。

技术领域

本发明属于抗生素药物合成技术领域，涉及一种脂肪酶-磷酸钙复合酶晶体、其制备方法及其催化合成克林霉素棕榈酸酯的方法。

背景技术

酶是一类由生物细胞产生且具有催化活性的特殊三维空间构象的蛋白质。众所周知，因绿色环保和节能高效，生物催化作为绿色催化的一种而备受人们的关注。然而酶是生物催化中使用最普遍的，经常被用作催化剂。酶作为一种生物催化剂催化的反应具有专一性强(酶催化具有区域选择性和立体选择性)、催化效率高、在常温常压等温和条件下能进行操作等优点。目前，酶催化技术在医药方面的应用是当前最为关注的领域之一，这主要是因为医药产品一般附加值高，且大多是光学活性物质，作为十分优良的催化剂—酶，用于多种高效药物的合成及制备将十分有效，潜力巨大。

克林霉素又名氯洁霉素，由Magerlein等人开发出发，是以氯离子取代林可霉素分子中第7位羟基而得到的半合成衍生物，其抗菌作用较林可霉素强4～8倍，在临床上已逐步取代了林可霉素的位置。其制品有克林霉素盐酸盐、克林霉素棕榈酸酯、克林霉素磷酸酯。

克林霉素作用机制为抑制细菌蛋白质合成，抗菌谱与林可霉素相同，耐药性较小。其临床上主要用于厌氧菌引起的腹腔和妇科感染，还用于敏感的革兰氏阳性菌引起的呼吸系统、关节、软组织感染，是治疗金黄色葡萄球菌骨髓炎的首选药物。由于其适用症为人群常见病情，因此成为国内稳步增长的一个品种。

盐酸克林霉素棕榈酸酯是一种常用的抗生素。它是由盐酸克林霉素经过某种化学修饰而得到的，由于克林霉素的口味极差，故不适合口服用药，而制成克林霉素棕榈酸酯后其口味大大改善，适合口服用药。克林霉素棕榈酸酯为一前体药物，口服用药后很快就在人体内水解出游离状的克林霉素从而发挥效用。它的抗菌作用是同类抗生素林可霉素的2～8倍，对厌氧杆菌、革兰阳性需氧菌、衣原体、支原体等均有活性。临床上常用于应对敏感菌引起的败血症、细菌性内膜炎、呼吸道遂、骨关节、软组织、耳部、泌尿生殖系统感染，以及对青霉素过敏的患者；此外对各种厌氧菌感染亦适用，并广泛用于治疗厌氧菌引起的溃疡，对各种类型的骨髓炎更有明显的效果。

国内已有多家企业开发了克林霉素系列品种。截至2006年10月，SFDA已核准下达的克林霉素系列原料药生产批件为47个。虽然持有克林霉素原料药生产批文企业已有30家，但实际上仍在生产的企业仅为10余家，生产规模有限，最大的生产规模约为60吨，较小的生产能力仅为数吨。全国总体规模为130吨左右，主要生产企业有浙江台州海翔药业、重庆凯林制药、浙江诚意药业、苏州第四制药厂、南阳普康等。

在半合成青霉素、头孢类的快速发展下，克林霉素原料药的工业化生产相对较为平稳，没有大起大落的现象，20多年来产量增长缓慢，从而影响了上游产品林可霉素的进一步消化。目前，从林可霉素原料药产量来看，2004年已超过了2500多吨，2005年又比上一年增长了5.44％，为2710.78吨。然而，其下游制剂产品并不畅销，其主要作为克林霉素系列产品的原料使用。

在林可霉素、庆大霉素用量锐减的形势下，克林霉素系列产品市场受到生产企业的广泛看好，由此推动了克林霉素系列产品近年来迅速增长。目前市面上的克林霉素是制剂品种繁多，包括注射器、乳膏、滴眼液、载药珊瑚人工骨、复合盖髓剂，成为一个具有多种释药途径的成人、儿童口服的多剂型药物。