[发明专利]一种植乳物杆菌GBE48及其应用以及α-葡萄糖苷酶活性抑制定量检测的方法

权利要求书

1.一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，命名为GBE48，微生物保藏号为：CGMCC No.15130。

2.权利要求1所述的植物乳杆菌在α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用；

和/或，权利要求1所述的植物乳杆菌在制备糖尿病防治药物中的应用。

3.一种α-葡萄糖苷酶活性抑制定量检测的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

将待检测菌株活化后，制备待测菌株上清液；

在孔板中加入PNPG底物溶液和PBS缓冲液以及待测菌株上清液，混合反应后，加入α-葡萄糖苷酶溶液，继续反应，然后加入Na₂CO₃溶液终止反应，将反应液在波长405nm处测定吸光值，记为OD_A；

同时，分别以：不含有α-葡萄糖苷酶但含有待测菌株上清液的体系B，含有α-葡萄糖苷酶但不含有待测菌株上清液的体系C，以及不含有α-葡萄糖苷酶但含有待测菌株上清液的体系D为对照组，分别测定各组反应液在波长405nm处测定吸光值，分别记为OD_B、OD_C，以及OD_D；

然后，按照如下公式计算α-葡萄糖苷酶活性抑制率：α-葡萄糖苷酶活性抑制率＝[1-(OD_A-OD_B)/(OD_C-OD_D)]×100％；

其中，所述待测菌株包括权利要求1所述的植物乳杆菌。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述菌株活化包括如下步骤：

将冷藏保存的菌株接入培养基中，然后在37℃下培养，活化三代后制备菌株上清液；

和/或，所述菌株上清液的制备包括如下步骤：

将活化后的菌株接入培养基中培养，得到活菌数量大于1×10⁹的发酵液，然后离心收集上清液，无菌过滤后得到菌株上清液。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PNPG底物溶液的浓度为1.5mmol/L，用量为50μL。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PBS缓冲液的浓度为0.1mol/L，pH为6.8，用量为15μL。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述待测菌株上清液的用量为15μL。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述α-葡萄糖苷酶溶液的酶活力为20U/mL，用量为70μL。

9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述混合反应的温度为37℃，时间为10min；

和/或，所述继续反应的温度为37℃，时间为50min。

10.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述Na₂CO₃溶液的浓度为0.1mol/L，用量为70μL。