[发明专利]改善的光-发射分子

权利要求书

1.制备修饰的挠足虫萤光素酶多肽的方法，其包括修饰SEQ ID NO:792、170、172、790、810、2、4、6、8、10、166、168、794、796、798、800、802、804、806、808、812或814的氨基酸序列、或者其缺少有功能的信号肽或无信号肽的氨基酸序列，所述修饰包括选自下列的至少一个修饰：

(a)下列中的至少一个：

(i)选自下列的基序：

在C₆的RCE、KCA或KCE，

在C₆的RCEE或KCEE，

在C₆的RCED、KCAD或KCED，

在C₆和/或C₁₀的ERC，

在C₆的RC或KC，

在C₁₀的GRC，

在C₅、C₆和/或C₁₀的RCA，

在C₆的RCAE或KCAE，

在C₅和/或C₆的RCAD或RCAT，及

在C₉的KCSD，

其中C₅、C₆、C₉和C₁₀是共有序列SEQ ID NO:905的保守的半胱氨酸；且

其中A是丙氨酸，R是精氨酸，E是谷氨酸，D是天冬氨酸，G是甘氨酸，S是丝氨酸，T是苏氨酸，且K是赖氨酸；

(ii)下列氨基酸序列的全体缺失：

当待修饰的氨基酸序列有信号肽时，跨信号肽序列的下游和对应于共有序列SEQ IDNO:905的第74、75、76、77、78或79位的位置的氨基酸残基的上游的氨基酸序列，或

当待修饰的氨基酸序列无信号肽时，对应于共有序列SEQ ID NO:905的第74、75、76、77、78或79位的位置的氨基酸残基的上游的氨基酸序列；

(iii)当待修饰的氨基酸序列是SEQ ID NO:792、170、172、790、810、166、168、794、796、798、800、802、804、806、808、812或814时，在至少一个对应于共有序列SEQ ID NO:905的第85或98位的位置的L；及

当待修饰的氨基酸序列有信号肽时，任选地还包括使信号肽序列失去功能或删除信号肽的修饰；或者

(b)选自下列的基序：

在C₁₀的ERC，

在C₅的RCA，

在C₅和/或C₆的RCAD，及

在C₉的KCSD，

其中C₅、C₆、C₉和C₁₀是共有序列SEQ ID NO:905的保守的半胱氨酸；以及

任选地还包括下列氨基酸序列的全体缺失：

当待修饰的氨基酸序列有信号肽时，跨信号肽序列的下游和对应于共有序列SEQ IDNO:905的第74、75、76、77、78或79位的位置的氨基酸残基的上游的氨基酸序列，或

当待修饰的氨基酸序列无信号肽时，对应于共有序列SEQ ID NO:905的第74、75、76、77、78或79位的位置的氨基酸残基的上游的氨基酸序列，及

当待修饰的氨基酸序列有信号肽时，任选地还包括使信号肽序列失去功能或删除信号肽的修饰，

由此产生修饰的挠足虫萤光素酶多肽。

2.权利要求1的方法，其中修饰的多肽在至少一个对应于共有序列SEQ ID NO:905的第85或98位的位置包含L。

3.权利要求2的方法，其中修饰的多肽在对应于共有序列SEQ ID NO:905的第85位的位置包含L。

4.权利要求2的方法，其中修饰的多肽在对应于共有序列SEQ ID NO:905的第98位的位置包含L。