[发明专利]鉴定小麦株高表型的特异引物对及其应用有效
申请号: | 201810076340.0 | 申请日: | 2018-01-26 |
公开(公告)号: | CN108004237B | 公开(公告)日: | 2020-06-30 |
发明(设计)人: | 何中虎;田秀苓;曹双河 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100081 北京市海淀区中关村南*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴定 小麦 表型 特异 引物 及其 应用 | ||
1.特异引物对;所述特异引物对由引物F1和引物R1组成;
所述引物F1为序列表的序列1所示的单链DNA分子;
所述引物R1为序列表的序列2所示的单链DNA分子。
2.权利要求1所述特异引物对的应用,为如下(b1)-(b6)中的至少一种:
(b1)鉴定或辅助鉴定小麦株高表型;
(b2)筛选或辅助筛选具有高株高表型的小麦;
(b3)筛选或辅助筛选具有低株高表型的小麦;
(b4)制备用于鉴定或辅助鉴定小麦株高表型的试剂盒;
(b5)制备用于筛选或辅助筛选具有高株高表型的小麦的试剂盒;
(b6)制备用于筛选或辅助筛选具有低株高表型的小麦的试剂盒;
所述高株高表型的小麦为株高大于等于84.2cm的小麦;
所述低株高表型的小麦为株高小于等于80.5cm的小麦。
3.含有权利要求1所述特异引物对的试剂盒;所述试剂盒的应用为如下(c1)-(c3)中的至少一种:
(c1)鉴定或辅助鉴定小麦株高表型;
(c2)筛选或辅助筛选具有高株高表型的小麦;
(c3)筛选或辅助筛选具有低株高表型的小麦;
所述高株高表型的小麦为株高大于等于84.2cm的小麦;
所述低株高表型的小麦为株高小于等于80.5cm的小麦。
4.权利要求3所述试剂盒的制备方法,包括将权利要求1所述的特异引物对中的各条引物进行独立包装的步骤。
5.鉴定或辅助鉴定小麦株高表型的方法,为方法甲或方法乙;
所述方法甲包括如下步骤:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用权利要求1中所述的特异引物对进行PCR扩增,将扩增产物采用DnpII酶切,得到酶切产物,如果酶切产物中具有275bp的DNA片段且不具有235bp的DNA片段、待测小麦为或候选为高株高表型的小麦,如果酶切产物中具有235bp的DNA片段且不具有275bp的DNA片段、待测小麦为或候选为低株高表型的小麦;
所述方法乙包括如下步骤:以待测小麦的基因组DNA为模板,采用权利要求1中所述的特异引物对进行PCR扩增,将扩增产物采用DnpII酶切,得到酶切产物,如果酶切产物中具有275bp的DNA片段且不具有235bp和40bp的DNA片段、待测小麦为或候选为高株高表型的小麦,如果酶切产物中具有235bp的DNA片段和40bp的DNA片段且不具有275bp的DNA片段、待测小麦为或候选为低株高表型的小麦;
所述高株高表型的小麦为株高大于等于84.2cm的小麦;
所述低株高表型的小麦为株高小于等于80.5cm的小麦。
6.鉴定或辅助鉴定小麦株高表型的方法,包括如下步骤:
检测待测小麦基因组DNA中是否含有特异DNA片段甲和特异DNA片段乙,如果所述基因组DNA中含有特异DNA片段甲且不含有特异DNA片段乙、待测小麦为或候选为高株高表型的小麦,如果所述基因组DNA中含有特异DNA片段乙且不含有特异DNA片段甲、待测小麦为或候选为低株高表型的小麦;
所述特异DNA片段甲为序列表的序列3所示的DNA分子;
所述特异DNA片段乙为序列表的序列4所示的DNA分子;
所述高株高表型的小麦为株高大于等于84.2cm的小麦;
所述低株高表型的小麦为株高小于等于80.5cm的小麦。
7.一种筛选或辅助筛选具有高株高表型的小麦的方法,包括如下步骤:
(d1)按照权利要求5或6所述方法鉴定待测小麦株高表型;
(d2)基于步骤(d1)的结果筛选或辅助筛选具有高株高表型的小麦;
所述高株高表型的小麦为株高大于等于84.2cm的小麦。
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