[发明专利]猫杯状病毒荧光免疫层析检测试纸条及其制备方法

说明书

本发明“猫杯状病毒荧光免疫层析检测试纸条及其制备方法”，涉及动物病毒检测技术，其特征在于：包括背衬以及在背衬上依次设置的结合垫、层析膜以及吸水垫，构成可使液体样品从结合垫层析到吸水垫的层析路径；所述结合垫上结合有荧光微球标记抗体复合物；所述层析膜上设置有与所述层析路径垂直的检测线和对照线。可用于现场快速检测,步骤简单快捷，且灵敏度和特异性都与PCR方法相当，可用于猫杯状病毒的检测和预防。

技术领域

本发明属于动物病毒检测技术领域,具体涉及猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)荧光免疫层析检测试纸条及其制备方法。

背景技术

猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV),为杯状病毒科,水疮性病毒属,是一种单链RNA病毒。FCV是猫病毒性呼吸道传染病主要表现为口腔溃疡、眼鼻分泌物增多、流涎、结膜炎、羞明、口腔炎、气管炎、支气管炎,伴有双相热。是猫的多发病,发病率高,强毒株感染可发生肺炎、呼吸困难、甚至死亡。主要传染源为病猫和带毒猫,病猫在急性期可随分泌物和排泄物排出大量病毒,直接传染易感猫。带毒猫经治疗,症状可消失,但临床康复后仍长期排毒,是危险的传染源。

目前,检测FCV的方法包括：电镜观察技术、免疫荧光试验、病毒核酸的PCR检测等试验，然而这些方法费时费力，所以难以推广虽然特异性和敏感性都很高,但需要专门的仪器设备和技术人员,只能用于实验室检测。这些方法均不适用于现场检测、快速检测和基层兽医部门临床检测。现有的针对动物病毒检测方法包括荧光免疫层析检测的方法,荧光免疫层析技术,是免疫荧光技术工和传统免疫层析技术相结合发展创新的一种定量新型检测技术。免疫层析技术以固定有检测线和控制线的条状纤维层析材料为固定相,测试液为流动相,通过毛细作用使待测物在层析条上移动,待测物在线处发生特异性免疫反应。游离物在线处发生免疫反应。该技术在保留胶体金免疫层析技术操作简便、检测快速、便携性强的优点外,还通过荧光示踪增强技术实现了检测结果的精确定量。

针对猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)建立荧光免疫层析检测试纸和检测技术,用于现场快速检测,有利于对感染流行病学的调查,从而为即的预防和控制提供科学的依据,有利于动物的健康发展,成为本领域技术人员函待解决的技术难题。目前还未见到报道。

发明内容

基于上述领域的技术需求和空白，本发明建立了针对猫杯状病毒(Felinecalicivirus,FCV)的荧光免疫层析检测试纸条及其制备方法,可以用于FCV的快速检测和现场检测：

为了达到上述技术效果,本发明的技术方案包括

一种猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)荧光免疫层析检测试纸条，其特征在于：

包括背衬以及在背衬上依次设置的结合垫、层析膜以及吸水垫，构成可使样品从结合垫层析到吸水垫的层析路径；

所述结合垫上结合有荧光微球标记抗体复合物；所述层析膜上设置有与所述层析路径垂直的检测线和对照线；

所述荧光微球标记抗体复合物是荧光微球与兔抗猫杯状病毒(Felinecalicivirus,FCV)F蛋白多克隆抗体的偶联物；

所述检测线由羊抗猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)多克隆抗体包被而成,所述对照线由葡萄球菌蛋白(Staphylococal Protein A，SPA)包被而成；

所述荧光微球粒径为180-240nm。

在一些实施例中，所述结合垫上，其特征在于，所述结合垫上，所述荧光微球标记抗体复合物的包被密度：以兔抗猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)F蛋白多克隆抗体质量计为7.5ug/每平方厘米。