[发明专利]一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法

说明书

本发明提供一种软膏中抗氧剂DL‑α‑生育酚及其干扰物的检测方法，包括以下步骤：1）供试品溶液的制备；2）对照品溶液的制备；3）检测。本发明提供的一种软膏中抗氧剂DL‑α‑生育酚及其干扰物的检测方法，采用优化条件的前处理和HPLC检测方法，能够使目标峰与干扰物峰达到有效分离，准确地测定软膏中抗氧剂DL‑α‑生育酚及其干扰物的含量，实现了对软膏中抗氧剂DL‑α‑生育酚及其干扰物的控制，从而保证了软膏的质量。

技术领域

本发明属于药物成分分析检测技术领域，涉及一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，具体涉及一种采用高效液相色谱法分析测定骨化三醇软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、DL-α-生育酚醋酸酯的方法。

背景技术

DL-α-生育酚，化学名称为(±)-2,5,7,8-四甲基-2-(4′,8′,12′-三甲基十三烷基)-6-色满醇，又称维生素E醇，是主要表现出维生素E活性的一类化合物。因为其维生素活性首次在1936年针对大鼠繁殖力因素的实验中被鉴定出来，故被命名为“生育酚”。在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在，它是脂溶性维生素，为一重要的抗氧化剂。DL-α-生育酚的同类物质有：d-α-生育酚；d-α-生育酚酯；dl-α-生育酚酯；琥珀酸氢d-α-生育酚酯；琥珀酸氢dl-α-生育酚酯；β-生育酚；γ-生育酚；δ-生育酚；生育酚油液；均具有维生素E的生理活性，其中以DL-α-生育酚的活性最大、抗氧化能力最强。

α-生育酚作为一种抗氧剂常用在食品和药品中。近年来，关于食品、奶粉、植物提取物以及乳膏中的DL-α-生育酚含量测定的方法很多，常用的有气相色谱法、反相高效液相色谱法、正相高效液相色谱法。但很少有专门针对软膏制剂中的DL-α-生育酚含量测定的高效液相色谱法，且目前报道的分析方法多存在保留时间不稳定，方法耐用性不好，保留时间容易受试剂质量的影响等不足。浙江嘉兴学院附属第二医院李旭梅公开了一种测定维生素E乳膏中的维生素E含量的反相高效液相色谱法的研究(李旭梅.反相高效液相色谱法测定维生素E乳膏中的维生素E含量.医药导报.2006年5月)；其中维生素E的检测条件为：Zorbax-SB C₁₈柱；流动相：甲醇；检测波长284nm；流速：1.0ml·min^-1。采用反相高效液相色谱法的研究较普遍；但软膏剂的基质主要为脂溶性物质，日常报道的反相HPLC法不太适用，且用反相溶剂提取软膏剂中的DL-α-生育酚操作繁琐费时，且影响最终测定结果的准确性。

中国农业大学崔亚娟等发表采用高效液相色谱法检测沙棘籽油中VE含量的文章(崔亚娟.高效液相色谱法检测沙棘籽油中VE含量.中国农业大学食品科学与营养工程学院.食品科技，2007年第8卷)。根据崔亚娟报道的方法采用纯硅胶柱进行软膏中的DL-α-生育酚含量测定，得到的色谱图显示在DL-α-生育酚主峰之前总是出现一个有干扰的肩峰，影响目标物质检测以及含量测定，对于后续的研究带来较大的困难，无法准确地表征软膏的质量情况。

软膏中主要的药物成分为骨化三醇，骨化三醇软膏中除DL-α-生育酚外，同时会添加有少量辅助抗氧剂2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)和DL-α-生育酚醋酸酯，后两种成分对软膏中DL-α-生育酚的测定存在一定的干扰。

在现有的技术里，未见专门针对软膏中的DL-α-生育酚含量检测的分析方法，而已有的参考方法未能实现良好的液相峰型与良好分离，亦未能同时兼顾软膏提取的操作繁琐问题。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，采用优化条件的前处理和HPLC检测方法，能够使干扰峰和目标组分峰达到有效分离，准确地测定软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、DL-α-生育酚醋酸酯，实现了对软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、DL-α-生育酚醋酸酯含量的控制，从而保证了软膏的质量。