[发明专利]一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法

权利要求书

1.一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，包括以下步骤：

1)供试品溶液的制备：称取软膏样品，加入正己烷加热溶解后冷却，定容后摇匀、过滤，取续滤液作为供试品溶液；

2)对照品溶液的制备：分别取DL-α-生育酚对照品、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)对照品和DL-α-生育酚醋酸酯对照品，加入正己烷溶解并定容，摇匀，得到混合对照品溶液；

3)检测：采用高效液相色谱法分别测定供试品溶液和混合对照品溶液，将获得的供试品溶液的液相色谱图，与混合对照品溶液的液相色谱图进行比较，根据相对保留时间和色谱峰面积，同时确定供试品溶液中DL-α-生育酚、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、DL-α-生育酚醋酸酯的含量；

步骤1)中，所述软膏为骨化三醇软膏；

步骤3)中，所述高效液相色谱法的色谱条件为：检测波长：285nm～292nm；流动相：正已烷-异丙醇-2,2-二甲氧基丙烷，其中，正已烷、异丙醇、2,2-二甲氧基丙烷的体积比为994:6:0～998:2:2；分析时间：10～15min；等度洗脱；

步骤3)中，所述高效液相色谱法选用的色谱柱为以纯硅胶为填充剂的色谱柱，250mm×4.6mm，5μm。

2.根据权利要求1所述的一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述软膏加入的质量与正己烷加入的体积之比为1:7～1:8，g/mL。

3.根据权利要求1所述的一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，其特征在于，步骤1)中，所述加热溶解条件为：加热容器：水浴；加热温度：50-70℃；加热时间：1-15min。

4.根据权利要求1所述的一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，其特征在于，步骤2)中，所述对照品溶液的制备，包括以下步骤：

A)取DL-α-生育酚对照品，加入正己烷溶解并定容，配制DL-α-生育酚对照储备溶液；

B)取BHT对照品，加入正己烷溶解并定容，配制BHT对照储备溶液；

C)取DL-α-生育酚醋酸酯对照品，加入正己烷溶解并定容，配制DL-α-生育酚醋酸酯对照储备溶液；

D)再分别取步骤A)、B)、C)中的DL-α-生育酚对照储备溶液、BHT对照储备溶液、DL-α-生育酚醋酸酯对照储备溶液，加入正己烷稀释并定容，配制为对照品溶液。

5.根据权利要求1所述的一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件为：检测波长：292nm；流动相：正已烷-异丙醇-2,2-二甲氧基丙烷，其中，正已烷、异丙醇、2,2-二甲氧基丙烷的体积比为994:6:0.5～994:6:2；分析时间：15min；等度洗脱。

6.根据权利要求1所述的一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，其特征在于，步骤3)中，所述高效液相色谱法还包括有以下色谱条件：流速：0.8～1.3ml/min；柱温：室温；进样量：50～100μl。

7.根据权利要求6所述的一种软膏中抗氧剂DL-α-生育酚及其干扰物的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法还包括有以下色谱条件：流速：1.0ml/min；柱温：20～25℃；进样量：100μl。