[发明专利]含有胸腺素β-4作为有效成分的稳定外用剂

说明书

本发明涉及含有胸腺素β‑4作为有效成分的稳定的外用剂，更具体地，本发明涉及具有改善生物活性和稳定性的具有治疗效果的Tβ4的外用剂。通过改进，根据本发明的外用剂可以维持Tβ4的生物活性并使由于氧化反应产生的Tβ4亚砜和由于聚集产生的多聚体最小化，从而使Tβ4处于稳定状态。

技术领域

本发明涉及包含胸腺素β4(Tβ4)作为活性成分的稳定外用剂。更具体地，本发明涉及一种治疗有效的外用制剂，其具有改善稳定性和生物活性的Tβ4。

背景技术

由SEQ ID NO：3表示的胸腺素β4(Tβ4)是一种具有四十三(43)个氨基酸的肽，其在N-末端被乙酰化。它是一种天然存在的肽，存在于各种组织和细胞类型中。Tβ4最初通过柱层析和凝胶过滤从牛胸腺中分离(Low等人，Proc.Nati.Acad.Sci.USA,78:1162-1166(1981))。Tβ4以1×10^-5至5.6×10^-1的摩尔浓度存在于大多数人组织和细胞类型中，并且尤其是在血小板，巨噬细胞和白细胞中高度存在。

通过圆二色性研究确定，Tβ4分子没有二级结构，其具有高度动态，非结构化和柔性构象。然而，当其LKKTET(氨基酸残基17-22)与G-肌动蛋白相互作用时，这种相互作用诱导结构化的N-和C-末端螺旋的形成。此外，Tβ4分子的其他部分与各种肌动蛋白亚结构域结合。Tβ4以1：1的比例或延伸构象与G-肌动蛋白结合。由于空间位阻，盐诱导的肌动蛋白聚合被阻断。Tβ4是真核细胞中的主要肌动蛋白螯合分子。因此，它通过维持大量的肌动蛋白单体来调节肌动蛋白丝的组装和分解，所述肌动蛋白丝调节肌动蛋白细胞骨架的动力学。

此外，Tβ4具有伤口愈合和抗炎特性。更具体地，预期Tβ4通过促进角质形成细胞和内皮细胞的迁移，胶原沉积和血管发生而表现出其治疗效果。

为了使Tβ4作为治疗剂显示出足够的治疗效果，不仅应该延长其生物活性而且其纯度和同质性也应得到保持。然而，由于Tβ4是多肽，不仅室温下长期储存会发生化学和物理变化，而且在冷藏条件下也会发生化学和物理变化。这会导致其生物活性和治疗效果的降低，以及其分解产物的产生会妨碍含有Tβ4的药物制剂的制备。

就此而言，蛋白质的降解途径可分为化学不稳定性和物理不稳定性两大类。化学不稳定性是指涉及脱氨反应形成新降解产物，或通过肽键的形成或裂解修饰蛋白质结构的过程。物理不稳定性是指不涉及共价修饰的变性，聚集和沉淀等(Manning等，药学研究，6：903-917(1989)；Tallan Stain，生物化学期刊.200:507-514(1953))。

在Tβ4的化学降解途径中，需要注意其组成氨基中的甲硫氨酸在该过程中被氧化形成的杂质亚砜。Tβ4亚砜在文献中(Eur.J.Biochem.223,345-350(1994)，天然药物5(12)，1424(1999))已有报道，Tβ4亚砜在肌动蛋白聚合或抗炎作用中表现出与Tβ4不同的行为。因此，在Tβ4储存期间形成的Tβ4亚砜会引起药理学活性的变化。

发明公开

技术问题

为了提供稳定状态的Tβ4，并将其药理活性长时间保持在恒定水平，本发明人制备了含有Tβ4作为活性成分并且能够使其变性最小化的制剂，基于此完成了本发明。

因此，本发明的目的是提供包含Tβ4的外用剂，其具有改善的稳定性。

解决方案