[发明专利]结合测定

权利要求书

1.一种用于测定包含重组的、可溶性人LAG-3Ig融合蛋白IMP321的制剂的生物活性的方法，其中所述方法包括使用生物层干涉术(BLI)测定所述IMP321与溶液中的MHC II类表达细胞上存在的MHC II类分子的结合，其中IMP321固定化到BLI探针的试剂层。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述MHC II类表达细胞以至少1E6/mL的密度存在。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述MHC II类表达细胞以至少4E6/mL的密度存在。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述MHC II类表达细胞以至少8E6/mL的密度存在。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述试剂层已用封闭试剂预处理以最小化所述MHC II类表达细胞与所述试剂层的非特异性结合。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述封闭试剂包括白蛋白。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述封闭试剂包括牛血清白蛋白。

8.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述MHC II类表达细胞是Raji细胞。

9.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述MHC II类表达细胞是从冷冻储备溶液获得的解冻的、即用型细胞。

10.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括针对多种不同浓度的IMP321，测定所述IMP321与所述MHC II类分子的结合速率，以及产生针对所述结合速率的剂量-应答曲线。

11.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在与用于测定所述制剂的所述IMP321的结合相同的条件下，通过使用生物层干涉术(BLI)测定参比样品的所述IMP321与MHC II类分子的结合来测定IMP321的所述参比样品的MHC II类结合活性，并且将针对所述参比样品测定的所述MHC II类结合活性与针对所述制剂测定的所述MHC II类结合活性进行比较。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述参比样品的所述MHC II类结合活性被设定为100％。

13.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，所述参比样品包含IMP321，所述IMP321已进行处理以降低其MHC II类结合活性。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，所述参比样品的所述IMP321已去糖基化、在37℃下储存至少12天、氧化、通过酸或碱处理变性，或暴露于光至少5天。

15.一种用于权利要求1所述方法的BLI探针。

16.根据权利要求15所述的探针，其特征在于，所述试剂层已用封闭试剂预处理以最小化MHC II类表达细胞与所述试剂层的非特异性结合。

17.根据权利要求16所述的探针，其特征在于，所述封闭试剂包括白蛋白。

18.根据权利要求17所述的探针，其特征在于，所述封闭试剂包括牛血清白蛋白。

19.一种用于测定重组的、可溶性人LAG-3Ig融合蛋白IMP321的生物活性的试剂盒，所述试剂盒包括BLI探针，和MHC II类表达细胞，所述BLI探针具有试剂层，所述IMP321固定化到所述试剂层。