[发明专利]免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒、使用该试剂盒的免疫细胞培养方法、通过该试剂盒或培养方法获得的免疫细胞无血清培养液以及包含该培养液的化妆材料组合物在审

专利信息
申请号: 201780083599.1 申请日: 2017-11-16
公开(公告)号: CN110214179A 公开(公告)日: 2019-09-06
发明(设计)人: 申东赫;郭东燮 申请(专利权)人: 恩克生物科技有限公司
主分类号: C12N5/078 分类号: C12N5/078;C12N5/00;A61K8/98;A61K35/17;A61Q19/00
代理公司: 成都超凡明远知识产权代理有限公司 51258 代理人: 魏彦;金相允
地址: 韩国*** 国省代码: 韩国;KR
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摘要:
搜索关键词: 免疫细胞 试剂盒 免疫细胞培养 培养液 无血清培养液 无血清培养 化妆材料 添加试剂 培养基 自然杀伤细胞 免疫疗法 采血 扩增 衰弱 激活
【权利要求书】:

1.一种免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒,包含:

B单元,由包含IL-2、L-谷氨酰胺以及细胞培养用培养基的基本溶液构成;

C1-1单元,由细胞因子1-1溶液构成,所述细胞因子1-1溶液,是通过将所述IL-12和IL-18溶解到所述基本溶液中,以0.5~5ng/mL的浓度包含IL-12,以2~50ng/mL的浓度包含IL-18来形成的;

C1-2单元,由细胞因子1-2溶液构成,所述细胞因子1-2溶液,是通过将所述IL-12和IL-18溶解到所述基本溶液中,以5.1~15ng/mL的浓度包含IL-12,以30~120ng/mL的浓度包含IL-18来形成的;

C2单元,由细胞因子2溶液构成,所述细胞因子2溶液,是通过将IL-15溶解到所述基本溶液中,以10~50ng/mL的浓度包含所述IL-15来形成的;

A1单元,由抗体1溶液构成,所述抗体1溶液,是以将抗CD16和抗CD56溶解到所述基本溶液中,分别以0.1~15ug/mL的浓度包含所述抗CD16和所述抗CD56来形成的;

A2单元,由抗体2溶液构成,所述抗体2溶液以1:6~10的体积比包含所述抗体1溶液和所述基本溶液;以及

D单元,由抗体-细胞因子混合溶液构成,所述抗体-细胞因子混合溶液,是通过将抗CD3溶解到所述细胞因子1溶液中,以1~12ug/mL的浓度包含所述抗CD3来形成的。

2.根据权利要求1所述的免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒,其特征在于,

所述A1单元比所述D单元先添加到淋巴球培养基中。

3.根据权利要求1所述的免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒,其特征在于,

所述A1单元中包含的所述抗CD16、抗CD56以及所述基本溶液分开包装,在培养基添加步骤中混合,从而形成所述抗体1溶液。

4.根据权利要求1所述的免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒,其特征在于,

所述A2单元中包含的所述抗体1溶液的抗CD16、抗CD56以及所述基本溶液与所述基本溶液分别分开包装,在培养基添加步骤中混合,从而形成所述抗体2溶液。

5.根据权利要求1所述的免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒,其特征在于,

所述D单元中包含的抗CD3和所述细胞因子1溶液分别分开包装,在培养基添加步骤中混合,从而形成所述抗体-细胞因子混合溶液。

6.根据权利要求1所述的免疫细胞无血清培养用培养基添加试剂盒,其特征在于,

按照C1-1单元、C2单元、A1单元、D单元、C1-1单元、A2单元、C2单元、A2单元、B单元以及C1-2单元的顺序,或

C2单元、C1-1单元、A1单元、D单元、C1-1单元、A2单元、C2单元、A2单元、B单元以及C1-2单元的顺序,或

C1-1单元、A1单元、D单元、C1-1单元、A2单元、C2单元、A2单元、B单元以及C1-2单元的顺序,或

C2单元、A1单元、D单元、C1-1单元、A2单元、C2单元、A2单元、B单元以及C1-2单元的顺序,

依次将各单元添加到淋巴球培养基中使用。

7.一种免疫细胞培养方法,包括:

第1步骤,在分离出的淋巴球中添加C1-1单元的细胞因子1-1溶液以及C2单元的细胞因子2溶液中的一种以上后,添加自体血浆;

第2步骤,在执行了所述第1步骤的培养基中添加A1单元的抗体1溶液;

第3步骤,在执行了所述第2步骤的培养基中添加D单元的抗体-细胞因子混合溶液;

第4步骤,在执行了所述第3步骤的培养基中添加C1-1单元的细胞因子1-1溶液后,添加自体血浆;

第5步骤,在执行了所述第4步骤的培养基中添加A2单元的抗体2溶液后,添加自体血浆或FBS;

第6步骤,在执行了所述第5步骤的培养基中添加C2单元的细胞因子2溶液后,添加自体血浆或FBS;以及

第7步骤,在执行了所述第6步骤的培养基中添加A2单元的抗体2溶液以及自体血浆或FBS。

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