[发明专利]枯草杆菌酶细胞毒素B亚基突变体

权利要求书

1.一种包含SubB的氨基酸序列的分离蛋白或其片段、变体或衍生物，其中氨基酸序列TTSTE(SEQ ID NO:3)的一个或多个氨基酸残基被修饰，其中所述分离蛋白能够结合α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸。

2.根据权利要求1所述的分离蛋白、片段、变体或衍生物，其包含所述TTSTE(SEQ IDNO:3)的下划线残基中的至少一个的非保守取代或缺失。

3.根据权利要求1或2所述的分离蛋白、片段、变体或衍生物，其包含所述TTSTE(SEQ IDNO:3)的下划线残基的缺失。

4.根据前述权利要求中任一项所述的分离蛋白、片段、变体或衍生物，其中所述分离蛋白包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。

5.根据权利要求2所述的分离蛋白、片段、变体或衍生物，其还包含所述TTSTE(SEQ IDNO:3)的下划线残基的缺失。

6.根据权利要求5所述的分离蛋白，其包含所述TTSTE(SEQ ID NO:3)的下划线残基的缺失。

7.一种分离的分子复合物，其包含权利要求1至6中任一项所述的分离蛋白，以及包含α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸的聚糖。

8.根据权利要求7所述的分离的分子复合物，其中包含所述α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或所述α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸的所述聚糖由肿瘤细胞表达或由猫科动物血细胞表达。

9.一种包含权利要求1至7中任一项所述的分离蛋白的组合物。

10.根据权利要求9所述的组合物，其是包含载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。

11.根据权利要求9所述的组合物，其是包含一种或多种检测试剂的诊断组合物。

12.一种检测α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸的方法，所述方法包括以下步骤：将权利要求1至6中任一项所述的分离蛋白或权利要求9或权利要求11所述的组合物与样品组合，从而形成包含所述分离蛋白和α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸的可检测复合物。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸由肿瘤细胞或猫科动物血细胞表达。

14.根据权利要求12所述的方法，其中，所述α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸是包含用于人类施用的重组糖基化药物、抗体和其他治疗性生物分子的样品或制剂中的污染物。

15.一种分离聚糖或分离表达所述聚糖的细胞的方法，所述聚糖包含α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸，所述方法包括以下步骤：将权利要求1至6中任一项所述的分离蛋白或权利要求9或权利要求11所述的组合物与样品组合，从而形成包含所述分离蛋白和聚糖的复合物，所述聚糖包含α2-3-连接的N-羟乙酰神经氨酸和/或α2-6-连接的N-羟乙酰神经氨酸；以及分离所述蛋白或细胞。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述细胞是肿瘤细胞或猫科动物血细胞。