[发明专利]从生物溶液中的单体蛋白质分离聚集蛋白质的方法

说明书

本发明提供了一种从生物溶液中的单体蛋白质分离聚集蛋白质的方法，所述方法包括：提供至少一个具有接触表面的过滤元件，其中所述过滤元件包括过滤介质，所述过滤介质包括：多孔基材；以及设置在所述多孔基材上的聚合物，所述聚合物包含烃主链和连接到所述烃主链的多个侧基，其中第一多个侧基中的每一个包括：(1)至少一个酸性基团或其盐；以及(2)间隔基团，其通过至少6个链中原子的链将至少一个酸性基团或其盐直接连接至烃主链；以及在有效地从所述单体蛋白质分离所述聚集蛋白质的条件下使初始生物溶液与所述过滤元件的接触表面接触，使得最终的生物溶液包括纯化的单体蛋白质。

相关申请的交叉引用

本申请要求2016年9月9日提交的美国临时专利申请62/385385的权益，该专利申请的公开内容以引用方式全文并入本文。

背景技术

靶生物材料，特别是单体蛋白质，诸如单体抗体(特别是单体单克隆抗体)的分离和纯化对于多种疾病的治疗用途是重要的，所述疾病包括类风湿性关节炎、克罗恩病、高胆固醇血症和多种癌症。例如，单克隆抗体优于常规疗法，因为它们可以针对特定靶标而对健康组织没有显著的不利影响。从单体蛋白质中去除聚集蛋白质对于此类治疗用途尤其重要。

聚合物材料已广泛用于多种目标生物材料的分离和纯化。此类分离和纯化方法可基于多个结合因子或机制中的任何一者，该多个结合因子或机制包括离子基团的存在、目标生物材料的尺寸、疏水相互作用、亲和相互作用、氢键合相互作用、共价键的形成等。

基于膜的技术，尤其是一次性的形式，在生物医药和疫苗制造工艺中变得越来越重要。膜已用于无源的、基于尺寸的分离，并且最近已用于有源过滤(例如，在纯化工艺的后期用于清除微小污染物)。

然而，官能化膜(包括官能的承载聚合物的膜)通常具有相对较低的生物材料结合容量，这通常限制它们在大规模纯化中的使用。因此，多孔珠粒色谱树脂(承载离子交换或其他交互官能团)已替代官能化膜，标准化地用于“捕集和洗脱”或“结合和洗脱”型蛋白纯化工艺。

因此，需要相对简单，成本有效和/或有效的方法(例如，涉及相对容易获得的起始物质和/或相对较少的工艺步骤)用于分离和纯化单体蛋白质，特别是从单体蛋白质(特别是单体单克隆抗体)聚集蛋白质。

发明内容

本公开内容提供了一种从生物溶液中的单体蛋白质分离聚集蛋白质的方法。所述方法包括：提供至少一个具有接触表面(例如，上游或上表面)的过滤元件；以及在有效地从单体蛋白质分离聚集蛋白质的条件下使初始生物溶液与过滤元件的接触表面(例如，上游或上表面)接触，使得最终的生物溶液包括纯化的单体蛋白质。

在此类方法的一个实施方案中，过滤元件包括过滤介质，所述过滤介质包括：多孔基材；和设置在所述多孔基材上的聚合物，所述聚合物包含烃主链和连接到烃主链的多个侧基，其中第一多个侧基中的每一个包括：

(1)至少一个酸性基团或其盐；以及

(2)间隔基团，其通过至少6个链中原子的链将至少一个酸性基团或其盐直接连接至烃主链。

在此类方法的另一个实施方案中，过滤元件包括过滤介质，所述过滤介质包括：多孔基材；和设置在所述多孔基材上的聚合物，所述聚合物包括至少一种单体的间聚单元，所述单体包括：

(1)至少一个烯属不饱和基团；

(2)至少一个酸性基团或其盐；以及

(3)间隔基团，其通过至少6个链中原子的链直接连接至少一个烯属不饱和基团和至少一个酸性基团或其盐。

定义

如本专利申请中所使用的：