[发明专利]用于细胞活化的方法和试剂盒

说明书

本文中提供了活化免疫细胞的方法。该方法包括提供免疫细胞群，并使该免疫细胞群与第一试剂和第二试剂接触。该第一试剂包括连接到第一结合子部分上的免疫细胞激活剂，并且该第二试剂包括至少一种捕获低聚物。该至少一种捕获低聚物能够与该第一结合子部分缔合。还提供了用于活化免疫细胞的试剂盒。

技术领域

本公开通常涉及用于细胞活化的方法和试剂盒，更具体涉及用于免疫细胞活化的方法和试剂盒。

发明背景

细胞疗法，例如T细胞疗法，已经在治疗血液肿瘤方面显示出显著的成功，并在治疗实体肿瘤方面显示前景。这些疗法通常需要从患者或供体中分离外周血单核细胞（PBMC）或T细胞，并随后活化并增殖以产生治疗剂量。通常，这种类型的个性化疗法包括从癌症患者身上取出血细胞、分离和激活免疫细胞、对其进行基因修饰以识别和攻击癌细胞、扩增基因修饰的免疫细胞并将扩增的免疫细胞再引入患者体内，以使患者的免疫系统可以接管。活化是整个过程的关键组成部分，因为需要有效引入遗传物质以便基因修饰免疫细胞及其鲁棒的扩增。

存在几种用于免疫细胞，尤其是T细胞的激活和扩增的技术平台。例如，抗体共价键合到该表面的超顺磁性、无热原性聚苯乙烯珠粒，例如Dynabeads® CD3/CD28（LifeTechnologies, Beverly, MA）是用于T细胞的分离、激活和扩增的最广泛使用的平台之一。但是，此类基于珠粒的平台当用于细胞群集和细胞活化时受困于显著的细胞损失，这主要是由于需要在细胞扩增完成后移除珠粒。避免珠粒去除问题的替代技术通常对细胞活化无效，特别是在通常进行用于基因修饰的病毒转导时的早期活化阶段。

细胞疗法还可以用其它免疫细胞如获自患者或第三方供体的自然杀伤（NK）细胞，或永生化细胞系来进行。在一些方面，基于NK细胞的疗法包括从患者或供体血液中分离NK细胞，激活并扩增该自然杀伤细胞，并将它们施用到患者体内。用于NK细胞的激活和扩增的大多数现有方案涉及与饲养细胞共同培养。此类饲养细胞体系难以标准化，并可能将不可预测性和污染引入细胞培养物。

因此，需要一种新的技术平台，其能够提供群集免疫细胞受体以便进行免疫细胞活化（例如用于群集细胞表面受体以便进行T细胞活化）的新颖途径并提供共刺激信号以提高增殖。此外，需要无饲养细胞的合成活化系统，其可以设计成实现免疫细胞如T细胞和NK细胞的受控与可再现的活化。

发明概述

一些实施方案涉及激活免疫细胞的方法。该方法包括提供免疫细胞群并使免疫细胞群与第一试剂和第二试剂接触。该第一试剂包括连接到第一结合子（binder）部分上的免疫细胞激活剂，该第二试剂包括至少一种捕获低聚物。所述至少一种捕获低聚物能够与第一结合子部分缔合。

一些实施方案涉及T细胞活化的方法。该方法包括向T细胞群中添加抗CD3抗体、连接到二级抗体上的第一结合子部分和包含至少一种捕获低聚物的第二试剂的步骤。该二级抗体能够与抗CD3抗体连接，并且该至少一种捕获低聚物能够与该第一结合子部分缔合。随后孵育该T细胞的群以活化该T细胞。

一些实施方案涉及用于免疫细胞活化的试剂盒。该试剂盒包括连接到第一结合子核酸序列上的免疫细胞激活剂，和包含至少一种捕获寡核苷酸的捕获核酸聚合物。该至少一种捕获寡核苷酸能够与该第一结合子核酸序列缔合。

附图

当参照附图阅读以下详述时，将更好地理解本发明的这些和其它特征、方面和优点。