[发明专利]多聚OX40结合分子及其用途

说明书

本公开提供了二聚、五聚和六聚OX40激动剂结合分子以及使用这类结合分子诱导抗肿瘤免疫的方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求2016年7月20日提交的美国临时专利申请系列号62/364,763的优先权，其公开内容通过引用全文纳入本文。

技术背景

肿瘤坏死因子超家族受体(TNFSFR)蛋白是免疫肿瘤治疗剂的重要靶标。例如，针对TNFSFR靶标(例如CD40，GITR，CD137和OX40等)的激动剂单克隆抗体目前正处于无数癌症适应症的临床试验中。

在许多情况下，TNFSFR靶标的激活需要表达受体的细胞表面上的至少三个非相互作用受体单体交联以形成稳定的受体三聚体，导致跨细胞膜的信号转导。将TNFSFR蛋白三聚体聚类成三聚体的“筏”导致更有效地激活信号转导级联。(参见，Valley等，J.Biol.Chem.，287(25)：21265-21278，2012)。通常，TNFSFR在细胞表面上的聚类可以通过多聚配体(例如三聚配体)的接合来实现。最近的工作已经证明，针对TNFSFR DR5的多聚激动性IgM抗体可以在不存在二级交联的情况下有效结合细胞表面上的多个DR5受体单体，并且相对于具有相同结合结构域的IgG分子具有增加的细胞毒性。参见2016年1月20日提交的PCT申请号PCT/US16/14153，其通过引用全文并入本文。

OX40，也称为CD134或TNFRSF4，是在活化的T细胞上表达的TNFSFR。OX40在活化的CD4+和CD8+T细胞上均有表达，但在静息幼稚T细胞或大多数静息记忆T细胞上未发现，并且也在调节性T细胞(Treg)，NKT细胞，NK细胞和中性粒细胞上表达(Croft，M，等，ImmunolRev.229：173-191(2009))。OX40表达对鼠CD4+CD25+FoxP3+Treg是组成型的，但它仅在活化的人FoxP3+Treg上表达(Croft，M.Ann Rev Immunol 28：57-78(2010))。激活后，效应T细胞和Treg均以延迟的动力学上调OX40表达(同上)。OX40与在活化的抗原呈递细胞(APC)(例如巨噬细胞和树突细胞(DC))上表达的其三聚配体(OX40L，TNFSF4)的相互作用在CD4+和CD8+效应T细胞中提供增强的共刺激增殖，存活和效应功能(同上，Stüber E，等，Immunity 2：507-21(1995))。给予适当的细胞因子环境，OX40信号转导还可以阻断Treg的免疫抑制能力，从而增强细胞毒性T淋巴细胞(CTL)功能(Linch，SN，等，Front.Oncol.5：doi：10.3389/fonc.2015.00034(2015))。OX40激动剂mAb可以增强CTL的效应功能和增殖，并且可以通过肿瘤内CD25+CD4+FoxP3+Treg细胞阻断免疫抑制(Piconese S，等，JExp Med.205：825-839(2008))。针对OX40的激动剂单克隆抗体已在临床前模型中显示出治疗活性(参见例如Linch，SN，等，Front.Oncol.5：doi：10.3389/fonc.2015.00034(2015))。此外，几种OX40IgG激动剂mAb正在人类临床试验中单独或与其他疗法组合进行研究，包括但不限于9B12(鼠抗OX40mAb，Curti BD，等，Cancer Res.73：7189-98(2013))；KHK4083(完全人抗OX40mAb，ClinicalTrials.gov#NCT02647866)；Medi0562(人源化抗OX40mAb，ClinicalTrials.gov#NCT02705482)；PF-04518600(完全人抗OX40mAb，ClinicalTrials.gov#NCT02315066)；和GSK3174998(人源化抗OX40mAb，ClinicalTrials.gov#NCT02528357)。然而，典型的二价IgG激动剂抗体需要交联以充分接合细胞表面上的TNFSFR以引发信号转导。

仍然需要开发更强效且因此更有效的OX40激动剂抗体用于癌症免疫疗法。

发明内容