[发明专利]与其受体IL-2Rβ结合的IL2作为用来增强自然杀伤细胞和调节性T细胞活性的平台

说明书

融合蛋白，其包含IL2和IL2Rβ(例如CIRB)，包含IL2、IL2Rβ和IL21R(例如CIRB21)，和/或包含IL2、IL2Rβ、和CD28(例如CIRB28)；表达这些融合蛋白的自然杀伤(NK)细胞以及使用这些自然杀伤细胞例如治疗患有癌症的受试者的方法；以及表达包含IL2、L2Rβ、和CD28的融合蛋白的调节性T细胞(T‑reg)以及使用这些调节性T细胞例如治疗患有自身免疫性疾病或GVHD的受试者的方法。

优先权要求

本申请要求于2016年5月19日提交的美国临时申请序列号62/338,757、以及于2017年3月15日提交的美国临时申请序列号62/471,456的权益。以上文献的全部内容通过引用结合在此。

技术领域

本文描述了表达包含IL2、IL2Rβ和IL21R的嵌合蛋白(例如CIRB21)和/或包含IL2、IL2Rβ、和CD28的嵌合体(例如CIRB28)的自然杀伤(NK)细胞，以及使用这些自然杀伤细胞例如治疗患有癌症、GVHD、和自身免疫性疾病的受试者的方法。

背景技术

自然杀伤(NK)细胞是在先前没有暴露于特异性抗原(1-3)时被赋予攻击恶性的和病毒感染的细胞的天生能力的淋巴细胞。若干白细胞介素，并且特别是IL2激活并且扩增关键免疫细胞，例如T细胞和NK细胞(4)。因此，在范围从癌症到病毒感染的多种疾病中，全身性IL2补充可以增强免疫力。然而，在癌症患者中，肿瘤细胞及其微环境(TME)通常通过协调多种逃逸机制，抑制NK细胞抗肿瘤活性(5)。

使用高剂量IL2输注的临床试验已经取得了有限的成功，这是由于像脓毒症的严重副作用(6-8)；而因体内IL2的短半衰期(小于10min)(9)并且由于低IL2剂量被T-reg和其他淋巴样细胞耗尽(10)，低剂量IL2功效受限。基于IL2的多种策略旨在增强NK细胞毒性，同时减小患者中的毒性，具有有限的功效。可以将离体培养的NK细胞通过在体内转移之前暴露于IL2来激活并且诱导增殖。与来自同种异体供体的NK细胞相比(12)，离体激活的自体NK细胞显示了更小的抗肿瘤功效(11)，这是因为自身I类HLA信号传导抑制了NK细胞毒性和细胞因子释放(13)。然而，为了使同种异体供体NK细胞是有效的，需要转移前淋巴细胞清除，用来减小对生长因子和细胞因子的竞争(14，15)。此外，在体内转移后，需要全身性IL2给予来维持NK细胞毒性，使患者暴露于全身性副作用。

在过去使用微转移模型用来在NK细胞中表达内源IL2的治疗努力显示了有限的成功，并且并不像用外源IL2刺激的NK细胞那样有效(16)。类似地，用来表达膜结合的内源IL2的努力并未显示高于亲本NK92细胞的任何优势(17)。使用NK细胞的若干免疫疗法策略的成功有限可以通过如下来解释：在宿主中对于细胞因子而言激活的NK细胞不能超过T-reg，并且诱导髓源性抑制细胞(MDSC)的TME有免疫抑制作用。MDSC和T-reg二者通过直接接触或通过TGFβ1的分泌来介导NK细胞功能抑制(18,19)。

发明内容