[发明专利]用于治疗与酸性α-葡糖苷酶基因相关的疾病的反义寡聚物及其使用方法

权利要求书

1.一种10至40个核碱基的修饰的反义寡核苷酸，其包含：与SEQ ID NO:1所示的人α葡糖苷酶(GAA)基因的前mRNA的内含子1内的靶区域互补的靶向序列，其中与所述靶向序列相比，所述靶区域包含至少一个另外的核碱基，其中所述至少一个另外的核碱基在所述靶向序列中不具有互补的核碱基，其中所述至少一个另外的核碱基在所述靶区域的内部；并且其中所述修饰的反义寡核苷酸是式(I)的反义寡聚物化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

每个Nu是一个核碱基，其一起形成靶向序列；

Z是8至38的整数；

每个Y独立地选自O和–NR⁴，其中每个R⁴独立地选自H、C₁-C₆烷基、芳烷基、-C(＝NH)NH₂、-C(O)(CH₂)_nNR⁵C(＝NH)NH₂、-C(O)(CH₂)₂NHC(O)(CH₂)₅NR⁵C(＝NH)NH₂和G，其中R⁵选自H和C₁-C₆烷基，并且n是1至5的整数；

T选自OH和下式的部分：

其中：

A选自-OH、-N(R⁷)₂和R¹，其中每个R⁷独立地选自H和C₁-C₆烷基，和

R⁶选自OH、–N(R⁹)CH₂C(O)NH₂和下式的部分：

其中：

R⁹选自H和C₁-C₆烷基；和

R¹⁰选自G、-C(O)-R¹¹OH、酰基、三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、-C(＝NH)NH₂、-C(O)(CH₂)_mNR¹²C(＝NH)NH₂和-C(O)(CH₂)₂NHC(O)(CH₂)₅NR¹²C(＝NH)NH₂，其中：

m是1至5的整数，

R¹¹具有式-(O-烷基)_y-，其中y是3至10的整数，和

每个y烷基独立地选自C₂-C₆烷基；和

R¹²选自H和C₁-C₆烷基；

R¹的每次出现独立地选自：

–N(R¹³)₂，其中每个R¹³独立地选自H和C₁-C₆烷基；

式(II)的部分：

其中：

R¹⁵选自H、G、C₁-C₆烷基、-C(＝NH)NH₂、-C(O)(CH₂)_qNR¹⁸C(＝NH)NH₂和-C(O)(CH₂)₂NHC(O)(CH₂)₅NR¹⁸C(＝NH)NH₂，其中：

R¹⁸选自H和C₁-C₆烷基；和

q是1至5的整数，和

每个R¹⁷独立地选自H和甲基；和

式(III)的部分：

其中：

R¹⁹选自H、C₁-C₆烷基、-C(＝NH)NH₂、-C(O)(CH₂)_rNR²²C(＝NH)NH₂、-C(O)CH(NH₂)(CH₂)₃NHC(＝NH)NH₂、-C(O)(CH₂)₂NHC(O)(CH₂)₅NR²²C(＝NH)NH₂、-C(O)CH(NH₂)(CH₂)₄NH₂和G，其中：

R²²选自H和C₁-C₆烷基；和

r是1至5的整数，和

R²⁰选自H和C₁-C₆烷基；或

R¹⁹和R²⁰连同它们与之附接的氮原子一起形成具有5-7个环原子的杂环或杂芳基环，并且任选地含有选自氧、氮和硫的另外的杂原子；和

R²选自H、G、酰基、三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、苯甲酰基、硬脂酰基、C₁-C₆烷基、-C(＝NH)NH₂、-C(O)-R²³、-C(O)(CH₂)_sNR²⁴C(＝NH)NH₂、-C(O)(CH₂)₂NHC(O)(CH₂)₅NR²⁴C(＝NH)NH₂、-C(O)CH(NH₂)(CH₂)₃NHC(＝NH)NH₂和下式的部分：

其中，

R²³具有式-(O-烷基)_v-OH，其中v是3至10的整数，并且每个v烷基独立地选自C₂-C₆烷基；和

R²⁴选自H和C₁-C₆烷基；

s是1至5的整数；

L选自–C(O)(CH₂)₆C(O)–和-C(O)(CH₂)₂S₂(CH₂)₂C(O)–；和

每个R²⁵具有式–(CH₂)₂OC(O)N(R²⁶)₂，其中每个R²⁶具有式–(CH₂)₆NHC(＝NH)NH₂，

其中G是细胞穿透肽(“CPP”)以及选自-C(O)(CH₂)₅NH-CPP、-C(O)(CH₂)₂NH-CPP、-C(O)(CH₂)₂NHC(O)(CH₂)₅NH-CPP、-C(O)CH₂NH-CPP和：

的接头部分，

其中CPP通过在CPP羧基末端处的酰胺键与接头部分附接，和

其中G可以出现一次或不存在。