[发明专利]T细胞受体

说明书

本发明涉及T细胞受体(TCR)，其结合衍生自MAGE‑B2蛋白的HLA‑A*0201限制性的肽GVYDGEEHSV(SEQ ID NO：1)。本发明的TCR显示了对于该MAGE表位的优异的特异性谱。还提供了编码TCR的核酸、工程化以提呈TCR的细胞、携带编码TCR的表达载体的细胞以及包含本发明的TCR、核酸或细胞的药物组合物。

技术领域

本发明涉及T细胞受体(TCR)，其结合衍生自黑素瘤相关抗原(MAGE)B2蛋白(氨基酸230-239)的HLA-A*0201限制性的十肽GVYDGEEHSV。本发明的TCR显示了对于该MAGE表位的优异的特异性谱。

背景技术

癌症睾丸抗原(CTA)是由约140个基因编码的肿瘤相关抗原(TAA)的亚类。这些抗原的表达限制于免疫豁免部位，如睾丸、胎盘和胎儿卵巢；它们通常不在其它组织中表达。已经在恶性肿瘤中观察到这些基因的表达。CTA的免疫原性导致在许多实体瘤中靶向这些抗原的癌症疫苗的广泛开发。在这一大类TAA中，黑素瘤相关抗原(MAGE)已成为癌症免疫疗法的有希望的候选物。

作为多基因家族的成员，已经报道了超过30种癌症睾丸(CT)基因，其被组织入染色体X上的基因簇(CT-X抗原)。CT基因簇位于Xq24和Xq28之间，并且包括基因家族如MAGE和NY-ESO-1。I型MAGE基因簇是被最广泛表征的，包括MAGE-A、MAGE-B和MAGE-C家族。MAGE-A蛋白由12种不同的MAGE-A基因家族成员(MAGE-A1至MAGE-A12)编码，并由保守的165-171个氨基酸碱基定义，其被称为MAGE同源结构域(MHD)。MHD对应于所有MAGE-A家族成员共有氨基酸的唯一区域。

T细胞识别以及与细胞表面分子和肽的复合物相互作用，所述细胞表面分子称为人白细胞抗原(“HLA”)，或主要组织相容性复合物(“MHC”)。肽衍生自较大的分子，其由还提呈HLA/MHC分子的细胞加工。T细胞和HLA/肽复合物的相互作用受到限制，需要T细胞对HLA分子和肽的特定组合具有特异性。如果不存在特异性的T细胞，即使其伴侣复合体存在，也没有T细胞响应。类似地，如果不存在特异性复合物但存在T细胞，则没有响应。该机制参与免疫系统对感染、自身免疫疾病的响应以及对异常(如肿瘤)的响应。

一些MAGE基因家族蛋白(MAGE-A至MAGE-C家族)仅在生殖细胞和癌症中表达。其它(MAGE-D至MAGE-H)在正常组织中广泛表达。所有这些MAGE蛋白家族具有与其它MAGE蛋白的序列紧密匹配的同源区，并且包含在免疫识别中展示为HLA/肽复合物的肽。因此，重要的是选择针对期望的MAGE肽/HLA-A2抗原高度特异性的TCR临床候选物。

MAGE B2是MAGE B基因家族的CTA成员。虽然认为它可能在胚胎发育中起作用，但功能未知。在肿瘤发病机理中，它似乎参与肿瘤转化或肿瘤进展的方面。MAGE B2涉及大量肿瘤，肽GVYDGEEHSV(SEQ ID No：1)对应于已知的MAGE-B2蛋白的氨基酸残基数231-241。

MAGE A4是MAGE A基因家族的CTA。MAGE A4在睾丸和胎盘中以及在不同组织学类型的肿瘤的显著部分中表达。肽GVVDGREHTV(SEQ ID No：2)显示与MAGE B2的交叉反应性，使得某些TCR能够结合展示两种肽的HLA分子。

发明内容

我们开发了一种TCR，其与展示MAGE B2肽GVYDGEEHSV的HLA分子结合，优于MAGEA4。在第一方面，本发明提供了一种T细胞受体(TCR)，其具有结合与HLA-A*0201复合的GVYDGEEHSV(SEQ ID No：1)的特性，当使用可溶形式的TCR在25℃和pH为7.1-7.5的表面等离子体共振测量时，具有约0.05μM至约20.0μM的解离常数，其中所述TCR包含TCRα链可变结构域和TCRβ链可变结构域，并且其中TCR可变结构域至少与GVYDGEEHSV(SEQ ID No：1)的残基V2、Y3和D4构成接触。