[发明专利]突变型博德特氏菌属菌株及其使用方法

说明书

一种减少或预防受试者的气道炎症发展的方法包括使受试者的呼吸道感染一定量的组合物的步骤，所述组合物包括药学上可接受的载体和足以定殖在受试者的呼吸道的减毒百日咳杆菌粘附素缺陷型博德特氏菌属活细菌。用减毒百日咳杆菌粘附素缺陷型博德特氏菌属活细菌感染受试者的步骤导致减少或预防受试者的气道炎症发展。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2016年3月29日提交的美国临时专利申请序列号62/314,843的优先权。

序列表

本申请包含已经以ASCII格式电子提交的序列表，并且将其通过引用以其全文特此并入。创建于2017年3月27日的所述ASCII副本名称为7056-0073_SL.txt并且大小是2,134字节。

关于联邦资助研究的声明

不适用。

技术领域

本发明总体上涉及微生物学、免疫学、过敏和医学领域。更具体地，本发明涉及在百日咳杆菌粘附素(pertactin)上有缺陷的减毒百日咳博德特氏菌活菌株及其在各种疾病环境中作为预防剂和治疗剂的用途。

背景技术

人们早就知道微生物及其组分会影响哺乳动物的免疫系统。感染强毒细菌和病毒会导致严重疾病或死亡。促成这种情况的同时，细菌和病毒的纯化组分也可以通过诱导炎症反应或以其他方式导致免疫系统以不希望的方式表现而引起病理。尽管如此，包括完整细菌、病毒或其部分在内的疫苗不仅被证明是开发用于预防严重感染的药物的最有力工具之一，而且还可以引起其他有益效果。例如，在实验模型中，发现名为BPZE1的减毒活百日咳疫苗候选物(参见WO2007104451A1)不仅可提供针对强毒百日咳博德特氏菌的保护，而且还通过抑制对过敏原的超免疫反应来发挥有效的抗过敏和抗哮喘作用(参见WO2013066272A1)。

尽管如此，开发安全有效的疫苗仍然具有挑战性，原因有几个。在这些当中，尽管有现代分子生物学技术和我们对微生物学和免疫学的理解的重大进展，但仍然很难生产出足够减毒但不会引起显著病理，同时具有足够的免疫原性来诱导对靶病原体的有效且长期的免疫反应的疫苗产品。在减毒全细胞活细菌疫苗的情况下，达到最佳水平的减毒特别麻烦，因为通过减少毒力因子的量或活性而过度减毒可导致免疫原性差和/或给药后在受试者体内无法存活或复制足够的时间来诱导免疫反应的疫苗。

发明内容

本文描述了百日咳杆菌粘附素缺陷型博德特氏菌属菌株的开发，及其在诱导针对病理性博德特氏菌属感染的保护性免疫反应以及治疗或预防呼吸道炎症(如在过敏性哮喘中观察到的呼吸道炎症)中的用途。百日咳杆菌粘附素是博德特氏菌属细菌的外膜蛋白，通过促进对各种细胞的粘附而起到毒力因子的作用。在下文描述的实验中，发现了BPZE1的百日咳杆菌粘附素缺陷型突变体称为BPZE1P(根据布达佩斯条约的要求于2016年12月12日以登录号CNCM-I-5150保藏在国家微生物菌种保藏中心(Collection Nationale deCultures de Microorganismes，“CNCM”)，25，Rue du Docteur Roux，Paris Cedex 15，75724，法国)，它能够在呼吸道定殖，诱导针对博德特氏菌属的抗体反应，并提供针对过敏性肺病的保护和治疗过敏性肺病。所述发现令人惊讶，因为正如其他人已经证明的，博德特氏菌属需要百日咳杆菌粘附素来抵抗嗜中性粒细胞介导的清除，在这种毒力因子上有缺陷的百日咳博德特氏菌预期会被过快地清除，从而不能诱导保护性免疫反应。参见，Inatsuka等人Infect.Immun.[感染与免疫]2010；78:2901–2909。