[发明专利]用于重组CXADR表达的组合物和方法

说明书

采用在细胞、尤其是免疫感受态细胞中重组表达CXADR来实现或改善通过腺病毒向细胞的基因递送。在特别优选的方面，免疫感受态细胞是NK细胞、T细胞、B细胞、巨噬细胞或树突细胞，并且基因递送包含编码疾病特异性抗原的重组核酸，例如作为患者特异性新表位或肿瘤相关抗原。

本申请要求2016年2月5日提交的序列编号为62/291,999的美国临时申请的优先权。

发明领域

本发明的领域是细胞的基因修饰的组合物和方法，尤其是导致细胞对病毒性感染敏感的修饰。

背景技术

背景描述包括可用于理解本发明的信息。并不承认本文提供的任何信息是现有技术或者与目前要求保护的发明相关，也不承认明确或隐含地引用的任何出版物是现有技术。

本文中的所有出版物和专利申请均通过引用并入，其与每个单独的出版物或专利申请被明确地且单独地说明而通过引用并入的程度相同。如果并入的参考文献中术语的定义或用法与本文提供的该术语的定义不一致或相反，则适用本文中该术语的定义，且不适用该术语在该参考文献中的定义。

腺病毒是充分表征的双链DNA病毒，并且因其在人体中引起呼吸道感染的能力而闻名。最近，对腺病毒基因组进行修饰，以产生能够生产包含各种转基因的腺病毒颗粒的组合物，以递送至多种感兴趣的细胞类型。5型腺病毒代表了这方面研究最透彻的平台之一，在商业空间中可获得许多试剂盒以产生用户确定的病毒(例如Vector BioLabs,USA,Malvern,PA 19355；或Thermo Fisher Scientific,USA,Waltham,MA 02451)。以这种方式产生的5型腺病毒已经用于细胞培养、动物甚至临床试验，进一步支持科学和临床实践者对该系统的熟悉。该病毒进入细胞被认为是通过柯萨奇病毒和腺病毒受体(CXADR)介导的。

不能产生CXADR或不能产生足够量的CXADR用于病毒性进入的细胞或组织限制了在这些细胞中5型腺病毒技术的引用，因此阻止了许多临床相关细胞和组织的转导，包括干细胞和免疫细胞。CXADR(Swiss-Prot登录号：P78310)是一种I型膜受体和免疫球蛋白超家族的成员之一(Science(1997)275；1320-1323)。CXADR具有通常大于200个氨基酸大小的细胞外结构域，并且被认为是对于紧密连接完整性来说所必需的上皮顶端连接复合物的组分(J Biol Chem(1999)274；10219-10226)。CXADR将含细胞内PDZ结构域的蛋白LNX(Numb配体蛋白X)集中到细胞间接触位点(J Biological Sci(2003)278；7439-7444)。CXADR还可以起到亲同种抗原的(homophilic)细胞粘附分子的作用(Molecular Brain Research(2000)77；19-28)，并且已经通过与位于PMN的质膜中的JAML的粘附相互作用在PMN的跨上皮迁移中观察到(Mol Biol Cell(2005)16；2694-703)。CXADR敲除小鼠表现出与心脏缺陷相关的胚胎致死表型(Genesis(2005)42；77-85)。基于这些多功能和参与，CXADR的主要生理作用不太可能是病毒进入受体。