[发明专利]包含双特异性抗体构建体的药物组合物

说明书

本发明提供新颖并且稳定的药物组合物，其包含双特异性单链抗体构建体、环糊精和缓冲液。

背景技术

重组DNA技术的出现使得过去三十年开发出许多蛋白质药物。基于蛋白质的药物现在是临床(前)开发中增长最快的治疗剂类别并且作为商业产品。与小化学药物相比，蛋白质药物在相对低浓度下具有高特异性和活性，并且通常提供高影响疾病诸如各种癌症、自身免疫疾病和代谢紊乱的疗法(Roberts，Trends Biotechnol.2014年7月；32(7)：372-80；Wang，Int J Pharm.1999年8月20日；185(2)：129-88)。

由于商业规模纯化工艺的进步，现在可以在首次制造时便以高纯度获得重组蛋白质。然而，蛋白质仅是勉强稳定的并且高度易受化学和物理降解影响。化学降解是指涉及共价键的修饰，诸如脱酰胺、氧化、新二硫桥键的裂解或形成、水解、异构化或去糖基化。物理降解包括蛋白质去折叠、不合需要的对表面的吸附和聚集。处理这些物理和化学不稳定性是蛋白质药物的开发中最具挑战性的任务之一(Chi等人，Pharm Res，第20卷，第9期，2003年9月，第1325-1336页；Roberts，Trends Biotechnol.2014年7月；32(7)：372-80)。

蛋白质聚集代表蛋白质的物理不稳定性的主要事件，并且由于使溶剂与疏水性蛋白质残余物之间的热力学不利相互作用最小化的固有趋势而发生。因为其在重折叠、纯化、灭菌、装运和储存过程期间经常遇到，所以其尤其是个问题。即使在蛋白质天然状态是高度热力学有利的溶液条件(例如，中性pH和37℃)下并且在不存在应力时，也可能发生聚集(Chi等人，Pharm Res，第20卷，第9期，2003年9月，第1325-1336页；Roberts，TrendsBiotechnol.2014年7月；32(7)：372-80；Wang，Int J Pharm.1999年8月20日；185(2)：129-88；Mahler J Pham Sci.2009年9月；98(9)：2909-34.)。

因为蛋白质聚集可影响治疗性蛋白质的生物活性，所以其是个问题。此外，蛋白质的聚集导致药物产物的不合需要的美学特征，并且由于从最终产物中除去聚集体所需的精细纯化步骤而使产物产率降低。最近，人们越来越关注并且证明聚集蛋白质(甚至是人源化或全人类蛋白质)的存在可显著增加患者发展对活性蛋白质单体的免疫应答的风险，导致形成中和抗体和耐药性或其他不良副作用(Mahler J Pharm Sci.2009年9月；98(9)：2909-34。

文献中已经报道了通过各种机制使蛋白质聚集最小化的若干努力。通过修饰蛋白质的一级结构，从而增加内部疏水性并且减小外部疏水性，蛋白质可以被稳定化并且因此防止聚集体形成和其他化学变化。然后，蛋白质的基因工程可导致功能性受损和/或免疫原性增加。另一种方法着重于通过使用各种机制诸如温度、压力、pH和盐来使聚集体解离(称为“解聚”)以回收功能性天然单体。目前，主要在下游处理的抛光步骤中作为杂质除去蛋白质聚集体。然而，在高水平的高分子量(HMW)的情况下，除去大量HMW不仅导致可观的产率损失，还使得稳健的下游过程的设计具有挑战性(Chi等人，Pharm Res，第20卷，第9期，2003年9月，第1325-1336页)。

在生物学和生物技术应用中保留蛋白质稳定性和活性提出了严峻的挑战。本领域中需要最优化的药物组合物，其物提供增强的治疗性蛋白质稳定化并且减少在配制、填充、装运、储存和施用期间的聚集和变性，从而防止功能丧失和不良的免疫原性反应。因此，本发明的目的是满足此需要。

发明内容

蛋白质不稳定性，并且特别地蛋白质聚集，是生物技术工业中日益严峻的挑战，生物技术工业中在治疗性蛋白质的整个寿命期间包括在重折叠、纯化、灭菌、装运和储存过程期间，均会遇到聚集。因此，本发明的目的是提供一种稳定的药物组合物，其包含：双特异性单链抗体构建体，其通过第一结合结构域结合靶细胞表面抗原并且通过第二结合结构域结合T细胞表面抗原CD3；β-环糊精；和缓冲液。