[发明专利]一种sgRNA及其构建的慢病毒载体和应用有效
| 申请号： | 201780001959.9 | 申请日： | 2017-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN108337893B | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 刘利平;鲍世韵;刘权 | 申请（专利权）人： | 深圳市人民医院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;A61K48/00;A61P35/00;C12R1/93 |
| 代理公司： | 11332 北京品源专利代理有限公司 | 代理人： | 刘锴;杨生平<国际申请>=PCT/CN2 |
| 地址： | 518020 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 慢病毒载体 构建 位点 基因治疗领域 核苷酸序列 编辑工具 基因敲除 肿瘤治疗 应用 基因 联合 | ||
1.一种sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-3所示。
2.根据权利要求1所述的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.一种CRISP/Cas9慢病毒载体，其特征在于，所述慢病毒载体包含如权利要求1或2所述的sgRNA的核苷酸序列。
4.一种如权利要求3所述的CRISP/Cas9慢病毒载体的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)根据HIF-1α第一个外显子序列设计sgRNAs；
(2)将得到的sgRNAs插入pLenti-CAS载体中，得到所述CRISP/Cas9慢病毒载体。
5.一种重组慢病毒，其特征在于，将包含如权利要求3所述的CRISP/Cas9慢病毒载体与包装辅助质粒psPAX2、pMD2.G和PEImax共转染哺乳细胞得到的重组慢病毒。
6.根据权利要求5所述的重组慢病毒，其特征在于，所述哺乳细胞为HEK293T细胞。
7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括如权利要求3所述的慢病毒载体和/或如权利要求5所述的重组慢病毒。
8.如权利要求3所述的慢病毒载体、如权利要求5所述的重组慢病毒或如权利要求7所述的药物组合物在制备抗肝脏肿瘤药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述肝脏肿瘤为肝癌。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述组合物还包括药学上接受的辅料。
11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于，所述辅料为赋形剂、稀释剂、载体、调味剂、粘合剂和填充剂中的任意一种或至少两种的组合。
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