[发明专利]一种促进人脐带间充质干细胞增殖的多糖组合物及其应用

说明书

本发明公开了一种麦冬多糖和白术多糖组合物及其制备方法，并公开了上述麦冬多糖和白术多糖组合物在促进人脐带间充质干细胞体外增殖的应用。本发明所述药物组合可以使间充质干细胞保持较高活性，增殖速度大幅度提高，并且防止其分化。应用本发明制备的脐带间充质干细胞对科学研究与临床应用具有重要意义。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种多糖组合物的制备与用途，具体涉及麦冬多糖与白术多糖组合物在促进人脐带间充质干细胞增殖方面的用途。

背景技术

人脐带间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells，MSCs）是指存在于新生儿脐带组织中的一种具有全能干细胞特点的细胞，是中胚层发育的早期细胞，可向中胚层和外胚层来源的组织分化，具有多向分化潜能，其形态和生物学特点与骨髓源性MSCs相似（Br JHaematology,2000,109:235-242）。脐带间充质干细胞（MSCs）具有较高的分化潜能，在一定的实验条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞、肝细胞、骨骼肌细胞等(Blood,2004,103:1669-1675)。从人脐带中分离出MSCs，其细胞含量、扩增能力优于骨髓MSCs，免疫原性比骨髓MSCs低，并且具有取材方便，无伦理学争议等优点，可作为一种新的替代细胞来源，用于各系统疾病的细胞移植及基因治疗。

麦冬为百合科沿阶草属植物麦冬的干燥块根、具有养阴生津、润肺清心之功效（中国药典.2015:155-156）。麦冬主要含甾体皂苷、高异黄酮、多糖等活性成分。麦冬中含有大量的多糖类成分，并由单糖与低聚糖类化合物组成。文献报道，麦冬多糖经水解之后主要由果糖组成，其果糖与葡萄糖的比例为35∶1（中草药，2005，36(5):1488）。现代药理研究表明麦冬多糖具有广泛的药理作用，包括降糖作用、抗心肌缺血和心肌梗塞作用、对肌体免疫系统的作用、抗氧化作用、抗肿瘤作用、外分泌腺保护作用等。麦冬多糖含量较高，提取工艺相对简单。

白术为菊科植物白术的干燥根茎，性温，味甘苦，具有健脾、益气等作用。白术多糖(PAM)是白术的主要活性成分，主要是由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖组成的杂多糖，具有调节免疫、抗氧化及抗衰老、抗肿瘤、降血糖等作用（中药材，2006:107–109）。

目前人脐带间充质干细胞已广泛应用于各种基础研究及疾病治疗的临床实验，但目前所使用的培养方案各异，培养效果并不稳定，常出现干细胞生长速度慢、形态改变导致性状改变、细胞活率降低等问题。本发明的目的是提供一种能促进人脐带间充质干细胞增殖的多糖组合物，用于获得稳定可靠的人脐带间充质干细胞。

发明内容

发明人在实验中发现，麦冬多糖与白术多糖组合物在合适配比和浓度下对人脐带间充质干细胞具有促进增值作用，促进体外培养的脐带间充质干细胞的增殖能力，增强细胞活性。本发明提供的多糖组合物可以作为人脐带间充质干细胞增殖促进剂以及用于制备促进人脐带间充质干细胞增殖的药物，也可为人脐带间充质干细胞增殖机理的研究提供大量干细胞。

本发明首先是提供一种麦冬多糖与白术多糖组合物的制备方法，该制备方法工艺简单，提取效率高。该技术方案以麦冬多糖与白术多糖为原料，经水提取和乙醇处理后制备获得。

在上述制备方法中：本发明所述麦冬与白术的重量份配比为300-100: 100；佳选为300:100。本发明水提取时，每次提取时水的用量为原料总重量的5-20倍，提取2-3次，每次提取时间为1-2h。本发明水提取后，过滤后将滤液浓缩，所得浓缩液采用体积百分含量为60-95%的乙醇水溶液进行醇沉处理，获得沉淀物即为麦冬多糖与白术多糖组合物。其中浓缩优选冷冻真空浓缩。

本发明所述的多糖组合物包括麦冬多糖与白术多糖。按照前述方法提取出麦冬多糖与白术多糖，其优选组合比例为3∶1。