[发明专利]一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法

说明书

一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，它涉及一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，该方法包括对照品溶液的制备、供试品溶液的制备，之后采用超高效液相色谱串联质谱法以梯度洗脱的方式将上述标准品溶液和供试品溶液注入仪器中，根据内标法计算阿维菌素残留。本发明通过对色谱和质谱条件的优选及供试品、标准品制备方法的试验，建立了土壤中阿维菌素的超高效液相色谱串联质谱检测分析方法；通过对色谱以及质谱条件的优化，建立了土壤中阿维菌素的检测方法，通过方法学验证试验研究表明：所建立的方法准确度高、专属性强、重现性良好，能有效检测土壤中阿维菌素残留量。

技术领域

本发明涉及土壤的检测检验技术领域，特别是涉及一种土壤中阿维菌素残留的检测方法。

背景技术

在我国，农业及畜牧业的规模越来越大，为了促进植物生长以及防病治病，农用抗生素使用量也随之增加，由此而产生的抗生素滥用问题愈发严重。农用抗生素的最终环境归宿为土壤，多数农药进入环境后并没有发挥应有的药效而是直接进入土壤及水体中，针对土壤环境，其残留对土壤动物、微生物及土壤酶活性产生影响，破坏生态环境，经食物链作用也可能进入人体。农用抗生素作为一种新的环境污染物所引起的危害不容忽视，必须高度重视。建立土壤中不同种类抗生素的痕量检测分析方法成为比较热门的探索方向。但土壤中的抗生素主要是对于四环素类抗生素的分析检测，阿维菌素的检测报道比较少见，且土壤基质不同提取和净化条件的选择也有所不同。

我国主要应用发酵法来生产阿维菌素，自八十年代引入了阿维菌素链霉菌，对其工艺的菌株培育、提取、发酵、纯化等各个步骤都有深入创新研究，并在农畜业及医疗方面得到了广泛的应用。现在，我国已成为阿维菌素唯一生产国，全部替代进口，中国企业已成立阿维菌素产业联盟，并已拥有上市公司。年产值达30亿。2013年，总产能达5500t左右。

由于阿维菌素残留在土壤中会威胁到生态平衡，故为了研究阿维菌素菌渣有机肥在土壤中环境行为、稳定性及衰减规律，必须首先建立土壤中阿维菌素残留的检测方法。由于基质效应的影响及检测限的要求，故不同于菌渣已建立的方法，需要重新建立在土壤中目标物质残留的检测方法。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术存在检测限较高、不灵敏；没有一种有效解决基质效应的影响，且现有技术无法快速/准确检测土壤中阿维菌素残留量的问题，而提供了一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法。

本发明的一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，它是按照以下步骤进行的：

一、供试品样品制备：

1)称取含有阿维菌素的土壤，加入甲氨基阿维菌素苯甲基盐、乙腈和去离子水，涡旋均质45～60s，超声辅助提取18～20min，而后置于离心机内，以3500～4000r/min离心8～10min，收集上清液，将收集的沉淀保存备用；

2)向上一步收集的沉淀中，加入甲氨基阿维菌素苯甲基盐、乙腈和去离子水，涡旋均质45～60s，超声辅助提取18～20min，而后置于离心机内，以3500～4000r/min离心8～10min，收集上清液；

3)将步骤1)和步骤2)收集的上清液合并后，定容，得待浸化样品；

4)取乙腈和活化液对HLB固相萃取柱进行活化，加入待浸化样品，以0.5～1.5mL/min流速过柱，待样液全部流出，用淋洗剂正己烷进行淋洗，用洗脱液洗脱待分析物，抽干所有的液体并收集，用氮吹仪吹近干，并加甲醇复溶，均质45～60s，过0.22μm滤膜后，得供试品溶液；

二、标准曲线绘制：