[发明专利]一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法

权利要求书

1.一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：

一、供试品样品制备：

1)称取含有阿维菌素的土壤，加入甲氨基阿维菌素苯甲基盐、乙腈和去离子水，涡旋均质45～60s，超声辅助提取18～20min，而后置于离心机内，以3500～4000r/min离心8～10min，收集上清液，将收集的沉淀保存备用；

2)向上一步收集的沉淀中，加入甲氨基阿维菌素苯甲基盐、乙腈和去离子水，涡旋均质45～60s，超声辅助提取18～20min，而后置于离心机内，以3500～4000r/min离心8～10min，收集上清液；

3)将步骤1)和步骤2)收集的上清液合并后，定容，得待浸化样品；

4)取乙腈和活化液对HLB固相萃取柱进行活化，加入待浸化样品，以0.5～1.5mL/min流速过柱，待样液全部流出，用淋洗剂正己烷进行淋洗，用洗脱液洗脱待分析物，抽干所有的液体并收集，用氮吹仪吹近干，并加甲醇复溶，均质45～60s，过0.22μm滤膜后，得供试品溶液；

二、标准曲线绘制：

取阿维菌素标准贮备液，用甲醇稀释，配制成浓度梯度为1～1000μg/L的标准工作溶液，每一个梯度的标准工作溶液内都含有1μg/L的甲维盐，使用超高效液相色谱-串联四级杆质谱仪进行检测；以阿维菌素峰面积与甲维盐峰面积比值作为纵坐标，以从1～1000μg/L的标准工作溶液中随机选取的标准工作溶液浓度作为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程和相关系数；

三、测定：吸取上述标准工作品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱-串联四级杆质谱仪中，根据内标法计算阿维菌素残留量；

色谱条件：色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C₁₈柱，色谱柱内径为2.1mm，柱长50mm，填料颗粒直径为1.7μm，柱温：40℃；流速：0.3mL/min；进样量12μL；流动相A1为有机相:色谱纯甲醇，流动相B1为无机相：含10mM氨的水溶液并用甲酸调pH至4，洗脱条件如下：

0～2min，75％A₁+25％B₁；

2～2.1min，由75％A₁+25％B₁调节为85％A₁+15％B₁；

2.1min～5min，85％A₁+15％B₁；

5～5.1min，由85％A₁+15％B₁调节为75％A₁+25％B₁；

5.1～6min，75％A₁+25％B₁；其中，A₁为有机相，B₁为无机相；

质谱条件：

ESI电喷雾离子源；

正离子扫描模式；

采集方式：MRM；

离子源内毛细管电压：4kV；

锥孔电压：45V；

去溶剂气温度：400℃；

离子源温度：150℃；

脱溶剂气流量：900L/Hr；

锥孔气流量：60L/hr；活化液为乙腈与水按体积比为2:3的比例混合而成；洗脱液为甲醇与乙腈按体积比为1:1的比例混合而成。

2.根据权利要求1所述的一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，其特征在于沉淀、甲氨基阿维菌素苯甲基盐、乙腈和去离子水的质量体积比为1g：0.001～0.003μg：7～9mL：1～3mL。

3.根据权利要求1或2所述的一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，其特征在于沉淀、甲氨基阿维菌素苯甲基盐、乙腈和去离子水的质量体积比为1g：0.001μg：8mL：2mL。

4.根据权利要求1所述的一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，其特征在于乙腈与活化液的体积比为1:1。

5.根据权利要求1所述的一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，其特征在于步骤1)和2)中的涡旋均质时间均为50～60s，超声辅助提取时间均为18～20min。

6.根据权利要求1所述的一种土壤中阿维菌素残留量的检测方法，其特征在于土壤中阿维菌素的含量为50～500μg/kg。