[发明专利]一种罗他夫辛片高效液相检测方法

说明书

本发明公开了一种罗他夫辛片高效液相检测方法，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：先用乙腈溶解罗他夫辛纯度为98％标准品，再用pH6.8磷酸盐缓冲液稀释制成浓度为0.5～1.5μg/ml液体；(2)制备供试品溶液：将罗他夫辛片溶于pH6.8磷酸盐缓冲液，恒温，搅拌，过滤的供试品溶液；(3)采用高效液相色谱分别对供试品溶液和对照品溶液进行检测，检测条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相A：乙腈；流动相B：酸性水溶液；流速：0.5～1.0ml/min；检测波长：205～230nm；柱温：20～40℃。该方法理论塔板数高，有效地避免了组分干扰影响检测结果的准确性，同时本方法检测结果准确可靠、分析时间短、成本低、操作简便等优点。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种罗他夫辛片高效液相检测方法。

背景技术

罗他夫辛，Rostafuroxin是一种新型的ouabain拮抗剂—能够通过拮抗ouabain对肾脏Na+-K+-ATP酶的作用而降低ouabain诱导的盐依赖性高血压患者的血压。该药物是特异作用在含有特异基因患者的基因表达蛋白上。可以有效的降低患者的血压，而且降压的效果，比普通的降压药物，效果显著。

罗他夫辛是本实验的研究对象，是罗他夫辛肠溶片的主药，对罗他夫辛肠溶片溶出度的检测可以指导我们制剂工艺的调整。

经查阅国内外相关文献、专利，发现其检测罗他夫辛含量的方法比较简单，利用现有的技术检测罗他夫辛肠溶片，色谱柱性能下降较快，分析成本高。因此有必要开发一种既能准确测定罗他夫辛含量又经济实用的分析检测方法。

罗他夫辛肠溶片主药含量比例小，且肠衣层包衣较厚(原处方增重约30％)。采用原方法进行罗他夫辛肠溶片溶出曲线检测时，多次进样后，出现色谱柱污染，柱效下降，罗他夫辛主峰前后出现干扰现象，冲洗色谱柱24h后，柱效变化不大。原方法对色谱柱伤害较大，分析成本高。

本发明提供的罗他夫辛溶出检测分析方法，不仅解决了上述色谱柱柱效下降问题，还明显改善了罗他夫辛主峰峰型，峰高明显变大，可使小规格药物的溶出可以更准确的被检出。

发明内容

罗他夫辛极微溶于水，微溶于二甲基亚砜(1％水溶液)，溶解于甲醇，略溶与乙腈和丙酮。罗他夫辛肠溶片是一种低规格的片剂，药片本身主要由辅料构成。针对现有的罗他夫辛溶出分析方法，本发明提供了一种使用高效液相色谱仪检测罗他夫辛释放度的方法。该方法理论塔板数高，有效地避免了组分干扰影响检测结果的准确性，同时本方法检测结果准确可靠、分析时间短、成本低、操作简便等优点。

一种罗他夫辛片高效液相检测方法，包括以下步骤：

(1)制备对照品溶液：先用乙腈溶解罗他夫辛纯度为98％的标准品，再用pH6.8磷酸盐缓冲液稀释制成浓度为0.5～1.5μg/ml液体；

(2)制备供试品溶液：将罗他夫辛片溶于pH6.8磷酸盐缓冲液，37℃恒温，搅拌，过滤的供试品溶液；

(3)采用高效液相色谱分别对供试品溶液和对照品溶液进行检测，检测条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

用于梯度洗脱流动相A：乙腈；

用于梯度洗脱流动相B：酸性水溶液；

流速：0.5～1.0ml/min；

检测波长：205～230nm；

柱温：20～40℃；

进行高效液相色谱分析，通过外标法以峰面积计算每片罗他夫辛片的溶出量，来测定罗他夫辛片中罗他夫辛的含量。

进一步优化，步骤2)所述搅拌转速为40～60/min，搅拌时间为90～100min。