[发明专利]CD151蛋白表达量的免疫组化检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201711478705.4 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN108414757A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 黄华艺;谭春艳;周莹;梁莉;姜烈君 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区人民医院 |
| 主分类号： | G01N33/574 | 分类号： | G01N33/574;G01N33/68 |
| 代理公司： | 广西南宁汇博专利代理有限公司 45114 | 代理人： | 邹超贤 |
| 地址： | 530021 广*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达量 免疫组化检测 试剂盒 免疫组化试剂盒 生物医药技术 快速检测 快速诊断 预后判断 治疗效果 肿瘤组织 标志物 封闭液 高表达 潜在的 苏木精 血清 二抗 抗体 提示 肿瘤 参考 检测 研究 | ||
1. CD151蛋白表达量的免疫组化试剂盒，其特征在于：包括CD151抗体；5%BSA 封闭液20mL；DAKO 即用型HRP 标记二抗10mL；3%H2O2 20mL；DAB；苏木精。
2.根据权利要求1所述的CD151蛋白表达量的免疫组化检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）制备免疫组化反应试剂和优化反应条件：CD151重组蛋白的制备与鉴定、制备单抗杂交瘤细胞-小鼠腹水模型、单抗杂交瘤-小鼠腹水CD151抗体的纯化；
（2）采用免疫组化技术对癌旁组织和肿瘤组织病理切片蛋白进行染色，检测染色浓度和染色范围；
（3）根据染色信号进行半定量评估，获得组织中CD151蛋白表达量。
3.根据权利要求1所述的CD151蛋白表达量的免疫组化检测方法，其特征在于：步骤（2）中所述采用免疫组化技术对癌旁组织和肿瘤组织病理切片进行检测，具体方法为：
A、取癌旁组织和肿瘤组织进行石蜡包埋制备病理切片；
B、CD151抗体进行第一孵育；
C、用型HRP 标记二抗进行第二孵育；
D、以DAB为显色剂显色，后再用苏木精复染；
E、使用封片剂封片。
4.根据权利要求3所述的CD151蛋白表达量的免疫组化检测方法，其特征在于：步骤E所述封皮剂为中性树胶或水溶性封片剂。
5.根据权利要求3所述的CD151蛋白表达量的免疫组化检测方法，其特征在于：
步骤B所述第一孵育的温度为37℃，孵育的时间为1-2 h。
6.根据权利要求3所述的CD151蛋白表达量的免疫组化检测方法，其特征在于：步骤C所述第二孵育的温度为37℃，孵育的时间为20—40h。
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