[发明专利]一种L-赤藓酮糖和赤藓糖醇生产方法

权利要求书

1.如下1)-3)任一一种应用：

1)tktA酶或其相关生物材料在生产L-赤藓酮糖中的应用，且所述应用的底物不含有羟基丙酮酸；

2)GoXDH酶或其相关生物材料在生产赤藓糖醇中的应用；

3)tktA酶或其相关生物材料和GoXDH酶或其相关生物材料在生产赤藓糖醇中的应用，且所述应用的底物不含有羟基丙酮酸；

1)所述应用的底物为羟基乙醛或乙二醇；

2)所述应用的底物为L-赤藓酮糖；

3)所述应用的底物为羟基乙醛；

各自酶的所述相关生物材料为能够表达所述各自酶的编码核酸分子的重组菌。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：

所述重组菌为将表达各自酶编码核酸导入宿主细胞中得到的重组菌；

所述表达各自酶编码核酸是通过重组载体的形式导入到所述宿主细胞中的。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

所述重组载体为携带有各自酶编码核酸的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒或逆转录病毒包装质粒。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述宿主细胞为细菌。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述细菌为大肠杆菌。

6.一种生产L-赤藓酮糖的方法，为如下1)或2)：

1)所示的方法包括如下步骤：以羟基乙醛为底物，用tktA酶或表达tktA酶编码核酸的重组菌进行催化反应，得到L-赤藓酮糖；

2)所示的方法包括如下步骤：以乙二醇为底物，先用EgDH酶或表达EgDH酶编码核酸的重组菌进行第一次催化反应，得到第一次催化产物；再以所述第一次催化产物中为底物，用tktA酶或表达tktA酶编码核酸的重组菌进行第二次催化反应，得到L-赤藓酮糖；

1)所示的方法包括如下步骤：所述用tktA酶进行催化反应还在辅助因子1存在的条件下进行；所述辅助因子1为硫酸镁和TPP；

或，所述用表达tktA酶编码核酸的重组菌进行催化反应还在辅助因子1存在的条件下进行；所述辅助因子1为硫酸镁；

2)所示的方法包括如下步骤：所述第一次催化反应还在辅助因子2存在的条件下进行；

所述辅助因子2包括NAD+和NOX2酶；

所述第二次催化反应还在所述辅助因子1存在的条件下进行；

1)所示的方法中，

所述羟基乙醛、tktA酶、TPP和硫酸镁的配比为200-2000mM：0.1-5mg/mL：0.01-5mM:0.1-10mM；

或，所述羟基乙醛、表达tktA酶编码核酸的重组菌和硫酸镁的配比为10-1000mM：0.2-20mg/ml：5mM；所述催化反应的pH值为6.5-8；

2)所示的方法中，

所述乙二醇、EgDH、tktA酶、NAD+、TPP、硫酸镁和NOX2的配比为100-400mM：20-40mg/mL：1mg/mL：2mM:1mM:5mM：10mg/mL；

所述第一次催化反应的pH值为8.5；

所述第二次催化反应的pH值为7。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述羟基乙醛、tktA酶、TPP和硫酸镁的配比为1600mM：1mg/mL：1mM：5mM。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述羟基乙醛、表达tktA酶编码核酸的重组菌和硫酸镁的配比为200mM：8mg/ml：5mM。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

1)所示的方法中，所述催化反应的pH值为7。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

所述乙二醇、EgDH、tktA酶、NAD+、TPP、硫酸镁和NOX2的配比为100mM：20mg/mL：1mg/mL：2mM:1mM:5mM：10mg/mL。